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3种液体培养基对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响
目的 探讨胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、LB和M-H 3种肉汤培养基对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响.方法 通过96孔和6孔板构建细菌生物膜,结晶紫染色对其进行半定量分析和显微镜观察生物膜形态,探讨TSB、LB和M-H肉汤培养基对表皮葡萄球菌生物膜形成的影响;提取细菌总RNA,逆转录后进行实时荧光定量PCR检测3种培养基对表皮葡萄球菌粘附基因表达量的影响.结果 与LB(0.149±0.047)和M-H (0.323±0.003)培养基相比,TSB(2.954±0.287)培养基能显著促进表皮葡萄球菌生物膜的形成(TSB vs LB,t=16.706,P<0.01;TSB vs M-H,t=15.877,P<0.01);与LB培养基相比,TSB培养基可显著促进表皮葡萄球菌icaA基因的表达(t=9.667,P<0.01)并抑制icaR基因的表达(t=13.283,P<0.01).结论 与LB和M-H肉汤培养基相比,TSB培养基能显著促进表皮葡萄球菌生物膜的形成和粘附基因icaA的表达.
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肠致病性大肠杆菌的生物膜形成对致病岛基因的影响
目的 研究不同pH值条件对肠致病性大肠埃希菌生物膜形成能力及对致病岛基因的影响.方法 将2株EPEC菌株(E11313和E11435)分别接种于pH值为7、9和11的LB培养基,用结晶紫染色半定量法检测2株菌株产生物膜能力,观察产生物膜菌株及非产生物膜菌株生物膜形成的差异,将2株菌株产生的生物膜溶解,提取总RNA,定量PCR检测不同pH浓度的生物膜与致病岛基因EspA表达水平的关系.结果 E11435为生物膜阳性菌株,E11313为生物膜阴性菌株,pH为7~9之间,生物膜的形成变化不大,当pH值=11时,菌株形成生物膜更容易,E11435菌株形成的生物膜可影响EPEC致病岛EspA基因的表达,且当pH=11时,EspA表达水平明显提高(P<0.05).结论 碱性环境可促进肠致病性大肠杆菌生物膜的形成.生物膜阳性肠致病性大肠杆菌可显著提高致病岛EspA基因的表达水平.