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cRNA标准品文献资料
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构建cRNA作为标准曲线的实时RT-PCR检测方法
目的建立一种新的基于LightCyclerTM技术,并通过构建cRNA标准曲线来对目的基因进行定量实时RT-PCR的检测方法.方法以T7 RNA聚合酶体外转录合成带有目的片段的cRNA作为标准品,并与样本同时进行反转录和PCR扩增,用此方法来检测目的基因在结直肠组织中的表达.结果采用cRNA标准品制作的标准曲线具有较好的线性关系(r＞0.99),而且在每次实验中都能取得较好的扩增效率,CEA与GAPDH的扩增效率分别大于88.7%和87.4%.结论此方法能较为准确的对组织中的目的基因表达进行定量检测.
