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5-HT2C受体亚型参与易化大鼠内嗅区-海马通路的突触传递:平面微电极阵列记录技术研究
本实验旨在运用64通道(8×8)平面微电极阵列记录技术(MED-64系统)探讨5-HT2C受体在调节内嗅区-海马突触传递和突触联系中的作用.将急性分离的大鼠海马脑片置于MED-64系统的电极平皿中,持续灌流通入95％O2和5％ CO2混合气的人工脑脊液,孵育2h后进行多电极阵列同步记录.选一个电极进行电刺激(刺激强度30～199 μA,正负双波脉冲,单波宽0.1 ms,频率0.1 Hz),其余63个电极作为记录电极.佳有效刺激部位恰好位于前穿质通路(perforant path,PP)上,电刺激结果可以分别在海马CA1区和齿状回(dentate gyrus,DG)记录到兴奋性突触后场电位(field excitatory post-synaptic potential,fEPSP).我们以往研究结果已显示内嗅区-CA1和内嗅区-DG直接突触联系是由谷氨酸非NMDA受体所介导的兴奋通路.在稳定地诱导出网络fEPSP后,分别给予5-HT2C受体激动剂DOI和选择性拮抗剂SB242084,观察与计算fEPSP的反应幅值与斜率变化.同时利用双线性内插法计算出64个点的电流源(current source)与电流井(current sink),并将其转换为二维电流源密度(two-dimensional current source density,2D-CSD)分布图.结果显示,结合fEPSP波的极相与2D-CSD成像,可见电刺激PP纤维在CA1区(腔隙分子层、锥体细胞层)和上部DG的分子层均发生突触兴奋引起的去极化,fEPSP为负向波,在空间上形成2D-CSD成像的电流井(蓝色区域).同时,可在DG的颗粒细胞层和门部检测出正向波,形成2D-CSD成像的电流源(黄色区域),这反映了颗粒细胞在树突部位发生去极化后很快沿门向CA3传播电信号.在此基础上,给予5-HT2C受体激动剂DOI后,海马内有效突触联系(＞基线20％的fEPSP)的空间网络范围显著扩大,突触传递效能显著增强.而相对应的是,给予5-HT2C受体的选择性拮抗剂SB242084,则海马内有效突触联系空间网络范围显著缩小,突触反应强度减弱.以上结果提示,内源性5 -HT作用于5-HT2C受体可易化内嗅区-海马突触传递效能,扩大有效突触联系,引起突触反应的兴奋作用.
关键词： 5-TH2C受体 内嗅区-海马通路 突触传递 平面微电极阵列记录技术 大鼠
