您当前的位置:
首页 > 文献资料
所属专业:
pSilencer载体文献资料
-
内源性siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用
目的 研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用.方法 利用siRNA表达载体 pSilencerTM 2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM.应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率好的载体进行验证.结果 在构建的6个siRNA表达载体中, pSilencer/siRAB5A-1和pSilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pSilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用.pSilencer/siRABEX5-1、pSilencer/siRABEX5-2和pSilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%.结论 成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具.