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细胞入侵及胞内复制文献资料
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鼠伤寒沙门菌中假定转录调控因子的筛选
目的·基因组信息学分析结合分子生物学实验对鼠伤寒沙门菌中假定转录调控因子进行筛选,以期发现新的转录调控因子和调控机制.方法·通过沙门菌基因组信息分析筛选得到30个假定转录调控因子,利用λ-Red同源重组系统敲除各目的基因.酸耐受实验检测各敲除株在对数期酸耐受应答中的差异;细胞感染模型检测各敲除株上皮细胞入侵能力和巨噬细胞内复制能力;利用realtime-PCR检测突变株中phoP及其下游基因的转录水平.结果·成功构建30个敲除株.△STM 14_0739、△STM14_2717和△STM14_1646对数期酸耐受能力较WT增强,△STM14_1878、△STM14_ 4338和△STM14 1965则较WT减弱.△STM 14_0739和△STM14_2717对HeLa细胞的入侵率降低,△STM14_1878和△STM14_2717在RAW264.7细胞内的24h复制率提高.Realtime-PCR结果显示STM14_ 2717敲除并不影响phoP转录.结论·研究发现了新的转录调控因子,为深入研究沙门菌致病机制提供新的方向.
