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发形霞水母触手提取物的蛋白稳定性及其溶血活性
目的：探讨不同环境因素和处理方法对发形霞水母（ Cyanea capillata）触手提取物（ tentacle extract ， TE）蛋白稳定性及其溶血活性的影响。方法结合蛋白浓度测定、溶血活性检测和SDS-PAGE分析等方法研究不同环境因素和处理方法对TE蛋白稳定性及其溶血活性的影响。结果 TE溶血活性呈明显的剂量依赖关系，其半数溶血分数HU50＝226μg／ml；40℃水浴1 h，能去除TE中大量杂蛋白，但仍保持显著溶血活性；TE在4℃放置28 d，其溶血活性保持稳定，25℃下3 d内其溶血活性变化不明显；pH值对TE溶血活性的影响呈钟形曲线，在pH 6．0～11．0之间活性相对稳定，pH 8．0是TE保持溶血活性的优pH条件；不同缓冲液对TE稳定性及其溶血活性影响显著，浓度大于26％的硫酸铵溶液对TE溶血蛋白具有良好的盐析作用。结论40℃水浴1 h预处理可显著减少TE中非活性蛋白组分，并降低样品黏性；4℃和pH 8．0是TE保持蛋白稳定性和溶血活性的适条件；浓度大于26％的硫酸铵盐析有利于溶血蛋白组分富集。
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不同阳离子对Cyanea capillata水母触手提取物溶血活性的影响
目的 探讨血浆对Cyanea capillata水母触手提取物(TOE)溶血活性的影响和孔道形成在其溶血机制中的作用.方法 在具有相同红细胞浓度的1％稀释的全血和0.5％红细胞悬液中,检测不同浓度(100、200、400μg/ml)的TOE产生的溶血效应,并在两套体系中分别加入20、50或100 mmol/L的K+、Ca2、Mg2+、Mn2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+、La3+、NH4+等阳离子和离子螯合剂EDTA,观察其对TOE溶血活性的影响.结果 在两套溶血检测体系中,TOE均呈现出剂量依赖性的溶血效应,TOE为200 μg/ml时在红细胞悬液产生的溶血强度高于稀释的全血；Mn2+、Zn2+、La3+、Cu2+、Fe2+和EDTA均明显降低TOE溶血活性(P＜0.05),其中以Zn2+的抑制作用强,而K+、Ca2、Mg2+、NH4+可不同程度地增强其溶血活性(P＜0.05).结论 血浆对TOE的溶血作用有一定的保护作用,而孔道形成可能在TOE的溶血机制中具有重要作用.
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发形霞水母触手提取物活性的初步研究
目的 初步分离发形霞水母触手提取物并探讨其生物学活性.方法采用自溶、离心的方法去除发形霞水母触手刺丝囊并获取触手提取物.通过阶段梯度阳离子交换色谱,应用0%.20%,40%,100%B液4种比例洗脱液将触手提取物分成4个组分,分别观察分离各组分的溶血、心血管等活性,并与触手提取物平行对比分析.结果成功分离到具有溶血、心血管活性的发形霞水母触手提取物,4个洗脱组分中,0%B液组分无上述3种活性,20%B液组分具有溶血活性、40%B液组分具有心血管活性,而100%B液组分则含有色素.结论通过阳离子交换色谱.初步将发形霞水母触手提取物中具有溶血活性、心血管活性以及色素等组分分离开来.为后续进一步纯化其单一活性组分打下基础.
