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萝卜硫素通过p-mTOR/p-S6信号通路增强CD8+记忆细胞前体细胞的分化
目的:检测萝卜硫素(sulforaphane,SFN)对CD8+T细胞分化、表型及胞内因子分泌的影响并探讨其可能的调控机制.方法:在体外培养实验中,按照SFN处理的剂量分为对照(0μmol/L)组、SFN 10 μmol/L组、SFN 20 μmol/L组.采用流式细胞术检测SFN对CD8+T细胞分化、表型及胞内因子分泌的影响以及mTOR siRNA对CD8+T细胞CD127和LKRG1表达的影响;采用qRT-PCR检测抗凋亡因子Bcl-2和Bcl-6的表达水平,Annexin-V/PI双染法检测SFN对CD8+T细胞凋亡的影响,Western blotting 检测信号通路蛋白p-mTOR、p-S6以及内参β-actin蛋白的表达.结果:SFN促进CD8+记忆细胞前体细胞的形成、显著降低CD8+T细胞PD-1和Tim-3的表达水平(P<0.01).同时,SFN处理后抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-6的表达显著增加、CD8+T细胞的凋亡受到显著抑制,p-mTOR和p-S6蛋白表达水平也显著降低(P<0.05或P<0.01).此外,SFN能够增加促炎性细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α的分泌(P<0.05).mTOR siRNA能够显著增加CD127表达及降低LKRG1表达水平(均P<0.01).结论:SFN可能通过抑制p-mTOR信号通路促进CD8+记忆细胞前体细胞的形成,获得更多年轻化的T细胞,为临床免疫细胞治疗提供新的思路.
关键词: 萝卜硫素 p-mTOR/p-S6信号通路 CD8+记忆细胞 前体细胞