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sCLU干预吉西他滨致MIA PaCa-2氧化损伤与吉西他滨化疗耐药相关性研究
背景与目的:吉西他滨(gemcitabine,GEM)作为治疗胰腺癌的一线化疗药物,随着其临床耐药性的出现,化疗疗效显著降低,而分泌型聚集素(secretory clusterin,sCLU)的表达与多种肿瘤细胞耐药密切相关.研究sCLU干预GEM致MIA PaCa-2氧化应激指标的改变,以期探讨GEM耐药机制.方法 :将MIA PaCa-2细胞暴露于质量浓度分别为0、0.63、1.25、2.50、5.00和10.00 μg/mL 的GEM培养液和sCLU(5.4 μmol/L)干预的0.63、1.25、2.50、5.00和10.0 μg/mL培养液中作用24 h,测定细胞增殖抑制情况,计算细胞的半数抑制浓度(50％ inhibitory concentration,IC50);将MIA PaCa-2细胞暴露于IC50的GEM培养液和sCLU干预培养6、12、 24、48和72 h,计算并观察细胞抑制率随时间变化趋势;将MIA PaCa-2细胞置于质量浓度分别为0、1.25、 2.50、5.00 μg/mL的GEM培养液和sCLU(5.4 μmol/L)干预培养24 h,测定细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)表达水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活力变化.结果 :细胞抑制率随GEM浓度的升高而升高,且具有明显的剂量-反应关系(P＜0.05);细胞抑制率在低质量浓度 (0.63 μg/mL)时,sCLU干预组高于GEM组,随着处理浓度增加,GEM组抑制率高于sCLU干预组(P＜0.05);GEM致MIA PaCa-2细胞IC50为2.50 μg/mL.与对照组比较,GEM、sCLU干预组ROS表达水平和SOD、CAT活力水平均升高(P＜0.05),且随着浓度的升高,ROS呈现明显剂量-反应关系,SOD、CAT呈先升高后降低趋势;相同剂量不同组间比较,sCLU干预组的ROS表达水平小于同剂量GEM药物组(P＜0.05);在GEM质量浓度为2.50和 5.00 μg/mL时,sCLU干预组SOD活力水平小于同剂量GEM药物组(P＜0.05),CAT活力水平大于同剂量GEM药物组(P＜0.05).结论 :GEM可抑制MIA PaCa-2细胞增殖,在一定药物浓度范围内,sCLU可干预GEM引起MIA PaCa-2细胞内ROS表达水平和SOD、CAT酶活力表达水平的明显变化,sCLU在一定程度可能通过调节GEM氧化损伤而产生耐药.
关键词： 分泌型聚集素 吉西他滨 MIA PaCa-2细胞 氧化损伤 化疗耐药
