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微小RNA-1187文献资料
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微小RNA-1187对半胱天冬氨酸蛋白酶-8介导的肝细胞凋亡调控的作用
目的 通过微小RNA-1187(miR-1187)靶向调节半胱天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)mRNA的表达,观察miR-1187对肝细胞凋亡的调控作用.方法 应用D-氨基半乳糖联合脂多糖构建BALB/c小鼠急性肝功能衰竭模型,取肝组织进行锁核酸(LNA)-miRNA微阵列分析和miRNA靶基因功能分析.体外培养胚胎小鼠肝细胞株2(BNL-CL2细胞),予以TNFα联合D-氨基半乳糖分别诱导转染miR-1187模拟物组及未转染组,以正常生长细胞为对照,应用实时(RT)-PCR、Western印迹等方法检测各组细胞miR-1187、caspase-8 mRNA及caspase-8蛋白的表达,并采用流式细胞技术测定细胞凋亡率.组间均数比较采用t检验.结果 miR-1187的信号值随急性肝功能衰竭进展明显下降.miR-1187与caspase-8 mRNA的3'非编码端(3'UTR)有直接的结合位点关系;miR-1187在未转染组表现为显著下调,在转染组下调减缓(t=6.371,P<0.01);caspase-8 mRNA 在未转染组表达显著增高.在转染组上升明显减少(t=4.539,P<0.01);转染组细胞凋亡率明显低于未转染组(t=3.365,P<0.05).结论 miR-1187为肝细胞凋亡的抑制因子之一;高表达miR-1187通过靶向调节caspase-8 mRNA的表达,阻抑肝细胞凋亡的发生.
关键词： 肝功能衰竭 急性 细胞凋亡 半胱天冬氨酸蛋白酶-8 微小RNA-1187
