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基于核糖体基因分析的中华血吸虫分子种系发生研究
目的测定中华血吸虫细胞核核糖体基因rDNA-ITS2和LSU序列,并根据这些序列,构建基因树,探讨中华血吸虫在裂体属内的系统发生位置. 方法以GNT-K法抽提基因组DNA后,用特异引物,PCR扩增目的基因.扩增后的PCR产物经纯化后克隆于载体质粒pT-adv中再次扩增后,提取并纯化质粒DNA,并以此作模板,使用通用测序引物M13(F/R)于Licor测序仪上进行测序.检索GenBank,查找曼氏血吸虫相关血吸虫两基因序列,将有关血吸虫同一基因排序、比较分析后,以毛毕吸虫和杜氏小裂体吸虫作为外群,使用PHYLIP和MEGA以邻接法和大简约法绘制系统发生树. 结果克隆并测定了中华血吸虫的rDNA-ITS2和LSU,毛毕吸虫的rDNA-ITS2序列,以及根据这些序列构建系统发生树. 结论中华血吸虫ITS2和LSU基因的系统发生树结果一致,均提示中华血吸虫归属于亚洲血吸虫种群,且中华血吸虫可能是该种群血吸虫类群中较古老的虫种.
