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新德里金属β-内酰胺酶1细菌文献资料
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NDM-1阳性细菌实时荧光 LAMP 方法的建立及应用
目的：建立一种实时荧光环介导等温扩增（LAMP）方法快速检测新德里金属β-内酰胺酶1（NDM-1）阳性细菌。方法根据NDM-1基因序列设计4套引物并进行优化，对LAMP反应中的荧光染料SYTO-9浓度进行优化，同时考察该方法的检出限和特异性。利用本方法检测72例临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌。结果本研究建立的实时荧光LAMP方法，其荧光染料SYTO-9的佳浓度为4μmol/L；63℃恒温扩增35 min可检出101拷贝/μL的标准阳性模板；特异性较好；对72例临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌检出的阳性率为16.7%（12/72），12株NDM-1阳性细菌经测序验证，准确率为100%。结论本研究建立的检测NDM-1阳性细菌的实时荧光LAMP方法具有快速、操作简便、特异性好、敏感性高、准确、可靠等优点，可以直观、实时地观察反应的进行情况，适合临床NDM-1阳性细菌的快速检测。
