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肝X受体对小鼠耐受性树突状细胞的诱导作用
为研究肝X受体(LXR)对小鼠骨髓来源耐受性树突状细胞的诱导作用,取C57BL/6纯系小鼠股骨骨髓,将骨髓细胞置于含rmGM-CSF(20 ng/ml)、rmIL-4(20 ng/ml)、10％ FBS、含／或不含LXR激动剂TP0901317(5μmol/L)的RPMI1640培养基中生长.于第7天时检测细胞表型,指标包括:CD11c、CD80、CD86、MHCⅡ、CCR7、PD-L1等;同日加入LPS(100 ng/ml)促成熟.LPS作用第3天时,检测细胞表型.以MACS分选未成熟和成熟CD11c+细胞,以丝裂霉素C处理细胞.另取BALB/c小鼠脾脏,MACS分选CD4+T淋巴细胞.将CD11c+细胞与CD4+T细胞混合培养,CCK-8法检测T细胞增殖情况.ELISA法检测细胞培养上清中IL 10水平.研究发现,TP0901317处理组:培养第7天时,CD11c+细胞约为70.2％;CD80、CD86和MHCⅡ在CD11c+细胞上为中低表达,表达水平在40.2％～50％; CD11c+CCR7+细胞约占78％; CD11c+ PD-L1+细胞约占90％.以LPS处理促成熟第3天时,CD11c+细胞约为85％;CD80、CD86和MHCⅡ在CD11c+细胞上的表达水平没有明显差异;CD11c+ CCR7+细胞约占86％; CD11c+ PD-L1+细胞约占99％.混合淋巴细胞反应显示,TP0901317处理组:成熟CD11c+细胞与未成熟细胞一样,均没有刺激CD4+T细胞增殖的能力.而在dTP0901317未处理组:成熟CD11c+细胞具有很强的刺激CD4+T细胞增殖的能力.ELISA检测结果显示,与TP0901317未处理组比较,TP0901317处理组CD11c+细胞能够产生更高水平的IL-10,具有显著意义(P＜0.05).故而可以认为LXR活化能够诱导小鼠骨髓细胞向耐受性树突状细胞分化.
