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生物膜干涉技术文献资料
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T7噬菌体展示人肺癌cDNA文库筛选丹参-人参组分复方靶点研究
目的 通过噬菌体展示技术筛选丹参-人参组分复方(丹参总酚酸、人参总皂苷、人参多糖)的作用靶点.方法 经过T7噬菌体展示人肺癌cDNA文库的4轮淘选,获得阳性噬菌体克隆,随机挑选10个克隆进行DNA提取和测序.基因序列用ExPASy网站的Translate tool查找开放阅读框(ORF).选取代表性多肽用生物膜干涉技术检测亲和力.结果 4轮淘选后阳性噬菌体克隆得到高度富集,10个样品中7个有相同的DNA序列,长度为471 bp(序列1),另外3个完全一致,长度为58 bp(序列2).序列1得到4个ORFs,序列2未进行分析.丹参-人参组分复方和多肽His-M NTGRFGKTTSSPALTLGNFQKPL亲和力高,KD=4.57×10-8 mol/L,人参多糖、丹参总酚酸和多肽亲和力分别为KD=7.23×10-8 mol/L、KD=7.66×10-8 mol/L,人参总皂苷与多肽没有典型的结合和解离效应.结论 本研究获得了与丹参-人参组分复方高亲和力多肽,为丹参-人参组分复方肺癌靶向治疗研究提供依据.