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  • B(a)P和DEHP联合染毒对HepG2细胞CYP1A1和CYP3A4酶活性的影响

    作者:陈曦;王建书;姜英;杨光涛;王晶;汪倩;饶凯敏;袁晶

    [目的]研究邻苯二甲酸二乙基己基酯[di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]和苯并(a)IL[benzo(a)pyrene,B(a)P]联合染毒人肝癌细胞株(HepG2细胞)对其细胞色素P450酶系1A1(cytochrome 1A1,CYP1A1)和细胞色素P450酶系3A4(CYP3A4)酶活性的影响.[方法]分别用B(a)P 64.0 μmol/L和DEHP 62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0μmol/L单独染毒和两者联合染毒HepG2细胞48 h和72 h.溶剂对照组为二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO<1%o).用CCK8法检测细胞活性;用7-乙氧基异吩噁唑-O-去乙氧基酶和7-乙氧基香豆素O-去乙基酶(EROD和ECOD)实验评价细胞CYP1A1和CYP3A4酶活性;分别用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测CYP1A1和CYP3A4基因的mRNA和蛋白质表达水平.[结果]与DEHP单独染毒组相比,联合染毒组细胞的存活率明显下降(P<0.01); EROD和ECOD活性却明显增加(P<0.05,P<0.01);联合染毒组CYP1A1基因仅有mRNA表达增加,但CYP3A4基因在mRNA和蛋白质表达水平均较DEHP单独染毒组明显升高(P<0.01).[结论]DEHP和B(a)P联合染毒诱导了HepG2细胞CYP1A1和CYP3A4酶活性,并在mRNA和蛋白质水平对CYP1A1和CYP3A4的表达量产生一定影响.

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