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酚酶活性抑制对小鼠体内日本血吸虫产卵的影响
目的观察小鼠体内日本血吸虫雌虫酚酶活性被抑制后对其产卵的影响.方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴20 d后,按500 mg/(kg*d)腹腔注射酚酶抑制剂-丙烯基硫脲,感染后第45 d剖杀小鼠,观察感染小鼠体内日本血吸虫雌虫子宫及小鼠肝脏中虫卵的数量及形态结构.结果与感染对照组相比,实验组小鼠雌虫子宫内虫卵数及每克肝组织虫卵数均明显减少.虫卵形态表现异常,主要是缺失硬化的卵壳结构.结论日本血吸虫雌虫酚酶活性被完全抑制后,雌虫不能产卵;不完全抑制则只能产生无正常卵壳的异常虫卵,证明具有活性的酚酶是虫卵正常形成过程中必不可少的成分, 提示血吸虫酚酶有可能作为抗血吸虫病的一个新靶位.
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酚酶抑制剂对日本血吸虫感染小鼠抗再感染的影响
目的观察雌虫酚酶活性被抑制后,日本血吸虫成虫诱导感染小鼠的伴随免疫作用.方法每只小鼠初次感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条,42 d后攻击感染(40±1)条尾蚴,其间初次感染21 d开始,按300 mg/kg的剂量隔日1次腹腔注射丙烯基硫脲,至攻击感染后20 d剖杀小鼠.同时设立实验对照组(未注射丙烯基硫脲组),初次感染对照组及攻击感染对照组.计算各组减虫率并进行统计学处理.结果实验组和对照组减虫率分别为86.4%和36.8%.经χ2检验差异有非常显著意义(χ2=10.7,P<0.01).两组检获虫体总数分别为28.9±10.2和34.8±14.2.经t检验差异也有显著意义(t=1.785,P<0.05).结论日本血吸虫酚酶活性被抑制后,虫卵卵壳形成被抑制,雌虫不能产出正常虫卵或虫卵不能发育成熟.依此建立的新模型提示,无可溶性虫卵抗原(SEA)存在,成虫能诱导小鼠更强的抗再感染作用.
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丙烯硫脲对日本血吸虫酚酶抑制作用的组织化学研究
目的通过组织化学方法研究丙烯硫脲对小鼠体内、体外日本血吸虫成虫酚酶(phenol oxidase,PO)活性的抑制作用.方法将42 d日本血吸虫活成虫置于含25 mmol/L邻苯二酚的磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中,28℃下孵育30 min,取出虫体置载玻片上,加2滴含0.1%戊巴比妥钠的PBS溶液,置Leica荧光显微镜下,分别在普通光照和紫外光激发下观察酚酶在虫体内的组织学定位.体外抑制实验时,加底物前先将成虫置于含5 mmol/L丙烯硫脲的PBS溶液中,28℃下孵育10 min;体内抑制实验时,在小鼠感染日本血吸虫尾蚴20 d后,按300 mg/kg隔日1次腹腔注射丙烯硫脲.结果体外抑制实验组雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳和雄虫体壁表层的桔黄色荧光或赭褐色颜色反应均基本消失;体内抑制实验组雌虫子宫内未见虫卵或虫卵样物质,仅见大量泥沙样卵黄颗粒,其荧光或颜色反应也基本消失.结论通过一种更灵敏的显示酚酶活性的组织学定位方法,观察到不仅雌虫含有酚酶,雄虫也有酚酶活性.证明丙烯硫脲对血吸虫成虫的酚酶活性有明显的抑制作用,从而可使小鼠体内血吸虫雌虫虫卵的形成被完全抑制.
