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sMiMi-CK文献资料
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sMiMi-CK cDNA的克隆、表达及活性检测
目的本实验拟通过RT-PCR技术,克隆及表达大鼠心肌线粒体sMiMi-CK基因.方法从大鼠心肌线粒体总RNA中扩增出sMiMi-CK DNA片段(1.33kb),将该片段克隆到载体pUC19上,对其进行酶切和测序,然后将其克隆到PBV220上,经温度诱导,使其在大肠杆菌中得以表达,并用NADH法测其活性.结果sMiMi-CK基因序列与国外报导的序列完全一致,表达的sMiMi-CK分子量为45.8KD,占菌体总蛋白的10.7%,其活性为2.74×105IU/L菌液.结论sMiMi-CK基因的克隆及表达,为今后从基因水平上研究心肌缺血性损伤的机制及治疗提供了依据.
