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人源核受体hLRH-1的表达纯化及多克隆抗体制备
目的:制备抗人源核受体hLRH-1的多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础.方法:构建含有hLRH-1基因全长克隆的原核表达载体pET507a-hLRH-1并用IPTG诱导其在Rosseta2菌株中表达重组蛋白His-hLRH-1,经亲和层析纯化后按常规方法免疫新西兰兔制备多克隆抗体,并用Western Blot对其特异性进行鉴定.结果:原核表达载体pET507a-hLRH-1经测序证实构建成功,将其转化大肠杆菌Rosseta2菌株后成功诱导表达重组蛋白His-hLRH-1,经纯化免疫新西兰兔后得到抗hLRH-1多克隆抗体,Western blot证实抗体具有高度特异性.结论:成功表达His-hLRH-1重组蛋白并制备出多克隆抗体,为进一步用于hLRH-1的免疫学检测及其功能研究奠定了基础.
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hLRH-1不同变异体在人胚胎组织的表达谱
目的 分析hLRH-1不同变异体在人胚胎组织的表达谱.方法 通过设计特异引物,并经常规RT-PCR方法检测hLRH-1v1和hLRH-1在三例引产胎儿各组织中的表达情况:同时以实时定量RT-PCR法分析总hLRH-1的mRNA的相对表达谱.结果 检测的结果显示,hLRH-1v1在人类各不同发育阶段的胎儿组织广泛表达,而hLRH-1则仅局限于肝、胃、小肠和胰腺组织.结论 hLRH-1v1和hLRH-1在人胎儿组织表达谱的差异提示它们在早期胚胎发育中可能起不同的作用.
关键词: hLRH-1v1 hLRH-1 实时定量RT-PCR 胎儿