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  • 双氢青蒿素抗恶性脑胶质瘤作用的研究

    作者:刘玉翠;杨阳;金嵩;臧琳;朱天信;齐玲

    目的 研究双氢青蒿素对人恶性脑胶质瘤U87细胞生长的作用. 方法 培养人恶性脑胶质瘤U87细胞,MTT法检测双氢青蒿素作用后U87 细胞的生长抑制率,倒置显微镜观察药物作用后细胞生长的变化.结果 0.5、5.0、50 μmol/L双氢青蒿素均明显抑制U87细胞的生长,倒置显微镜下观察到药物作用后细胞密度明显降低. 结论 双氢青蒿素能明显抑制脑胶质瘤细胞的生长增殖.

  • 重组腺病毒介导的转录因子Runx3在神经胶质瘤细胞中的表达及其亚细胞定位

    作者:白文栋;张瑞;孟艳玲;曹云新;王涛;赵晶;杨安钢

    目的:制备含有融合Flag标签的Runx3基因的复制缺陷型重组腺病毒,感染神经胶质细胞瘤U251,观察外源Runx3在细胞中的表达及亚细胞定位.方法:用PCR的方法扩增Runx3基因,并将Flag标签蛋白的编码基因与RUNX3基因进行融合,构建腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-Runx3,经Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ双酶切鉴定并测序.利用电转化方法将经Pme Ⅰ线性化的pShuttle-CMV-Runx3穿梭载体导入BJ5183重组细菌,获取重组腺病毒质粒Ad-Runx3,再将经Pac Ⅰ线性化的Ad-Runx3重组病毒骨架质粒转染293A包装细胞,包装并扩增病毒.利用该病毒感染神经胶质细胞瘤U251,用免疫印迹法观察外源Runx3在细胞中的表达,用间接免疫荧光法观察其在细胞内的定位.结果:构建并包装表达Runx3蛋白的重组腺病毒,用重组腺病毒感染U251细胞后,经免疫印迹和间接免疫荧光法检测,可见外源导入的Runx3蛋白在细胞核内的特异性定位.结论:成功制备了含有融合Flag标签的转录因子Runx3基因的重组腺病毒,感染U251细胞,在细胞中观察到该分子表达后定位于细胞核中,为研究Runx3在神经胶质瘤发生中的作用奠定了实验基础.

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