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电针对部分雄激素缺乏综合征大鼠睾丸P450 scc／SF-1表达的影响
目的：观察中老年部分雄激素缺乏综合征（PADAM）大鼠睾丸细胞色素P450侧链裂解酶（P450scc）和类固醇生长因子-1（SF-1）的表达及电针干预对其表达的影响，探讨P450scc和SF-1在电针调节睾酮分泌过程中的作用。方法将40只雄性SD大鼠分为正常组（n＝10）和造模组（n＝30），造模组腹腔注射环磷酰胺复制PADAM模型。从造模成功的大鼠中随机选取20只分为电针组（n＝10）和模型组（n＝10）。电针组取“肾俞”“关元”针灸，留针15 min，每日治疗1次。在第8周用ELISA分别检测正常组、电针组和模型组大鼠血清的总睾酮（TT）、游离睾酮（FT）水平；免疫组织化学法检测P450scc蛋白表达；Western印迹检测SF-1蛋白表达；RT-PCR检测P450scc和SF-1mRNA的表达。结果治疗8 w时，ELISA结果显示，电针组血清TT、FT水平明显高于模型组（ P＜0.01）；电镜结果显示，电针组Leydig细胞正常，线粒体和内质网含量较模型组多；HE染色结果显示，电针组睾丸组织中曲细精管管腔肿胀程度较模型组减轻，Sertoli细胞较模型组排列整齐；免疫组化和WB结果显示电针组P450scc和SF-1蛋白表达较模型组升高（P＜0.01）；RT-PCR结果显示，电针组P450scc和SF-1mRNA表达较模型组升高（P＜0.01），且两者具有相关性（｜r｜≥0.8，P＜0.01）。结论电针能明显升高PADAM大鼠体内睾酮水平，改善睾丸Leydig细胞和Sertoli细胞病理表现。电针干预后可提高P450scc和 SF-1的表达，这可能是电针治疗PADAM的作用机制之一。
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IL-6对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1合成皮质醇的影响
目的:探讨白介素6(IL-6)对小鼠肾上腺皮质细胞系Y1合成皮质醇能力及合成过程中类固醇急性调节蛋白(StAR)相关基因表达的影响.方法:100 ng·ml-1 IL-6单独或联合10-9 mol·L-1促肾上腺皮质激素(ACTH)处理Y1细胞后,台盼蓝拒染法检测细胞活力,放免法检测细胞皮质醇合成量,实时荧光定量PCR法检测StAR mRNA表达水平.结果:IL-6单独或联合ACTH处理Y1细胞后,皮质醇合成量增加(P＜0.05),同时StAR mRNA表达水平上升(P＜0.05).结论:IL-6可单独或联合ACTH通过促进StAR mRNA表达增强Y1细胞合成皮质醇的能力.
关键词： 白介素6 Y1细胞 皮质醇 细胞色素P450侧链裂解酶 -
尼古丁对胎儿宫内发育的影响及其甾体激素合成干扰机制
目的 探讨孕期尼古丁暴露所致胎儿宫内发育迟缓(IUGR)的甾体激素合成干扰机制.方法 选用Wistar雌性和雄性大鼠,适应性喂养1周后,每晚18:00按雌:雄=2:1合笼,次晨检见阴栓者记为受孕0日.尼古丁组从孕8日起皮下注射尼古丁1.0 mg/kg,2次/d,给药容积为2 mL/kg,直至孕21日.对照组给予等容量的生理盐水.处死孕鼠,收集血清,摘取并冻存肾上腺和胎盘组织.剖腹取胎,记录胎盘质量、胎鼠体质量及其他发育指标,摘取并冻存孕21日胎鼠肾上腺.用放射免疫法检测孕鼠血清皮质酮、胎盘催乳素和雌三醇水平.观察胎盘组织病理学改变.用实时定量RT-PCR方法检测肾上腺StAR和P450scc、胎盘2型11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD-2)、肾上腺细胞色素P4501A1(CYP1A1)及其芳烃受体(AhR)的mRNA表达.结果 从孕8日开始皮下注射尼古丁明显导致大鼠IUGR的发生(P<0.01).尼古丁使孕鼠血清皮质酮水平在孕中期及孕晚期均明显升高(P<0.05).相对于对照组,孕中期及孕晚期尼古丁组孕鼠肾上腺StAR和P450scc的mRNA表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),但是胎鼠肾上腺的StAR和P450scc的mRNA表达水平则有下降趋势(P=0.16,P=0.11).同时,尼古丁组足月大鼠胎盘迷路区的病理形态学发生了明显的改变,包括迷路区出血和滋养层细胞变性;并使孕中、晚期反映胎盘功能的孕鼠血清胎盘催乳素水平(P<0.05)、血清雌三醇水平以及胎盘11β-HSD-2的mRNA表达显著下降(P<0.05).尼古丁对母鼠肾上腺的CYP1A1和AhR的mRNA表达有一定的诱导作用,但是对胎鼠肾上腺的CYP1 A1和AhR的mRNA表达没有明显影响.结论 孕期接触尼古丁可明显导致IUGR的发生,且与母体及胎儿甾体激素内环境紊乱密切相关.
关键词： 尼古丁 宫内发育迟缓 甾体激素急性调节蛋白 细胞色素P450侧链裂解酶
