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RT-PCR效率文献资料
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二甲基亚砜和5-氮胞苷诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率
目的 分析二甲基亚砜(DMSO)和5-氮胞苷(5-Aza)诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率,比较两者的区别.方法 将研究对象分为3组.一组使用常规方法对P19细胞进行培养,为阴性对照组；一组使用DMS01.0％进行诱导；一组使用5-Aza 10 μmol/L进行诱导.对所有研究对象使用RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量.结果 DMSO和5-Aza组诱导4d后,细胞均以克隆集落方式增殖,梭形细胞明显增多.8d出现自发性节律收缩的心肌样细胞.诱导后2 w,5-Aza组分化细胞明显多于DMSO组.RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量,除阴性对照组外,其他两组均表达心肌早期分化基因.每组15 d后表达量与本组7d表达量相比较均明显增加.此外,5-Aza组诱导28 d基因表达量明显高于DMSO组28 d.结论 DMS0 1.0％和5-Aza 10 μmol/L均可诱导P19细胞转化为心肌细胞,5-Aza 10 μmol/L的诱导效率高于DMS0 1.0％.
