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  • pcEgr-hp53辐射诱导表达载体的构建及其体外抗肿瘤的作用

    作者:董丽华;付士波;杨英;刘扬;龚守良

    目的构建辐射诱导表达载体pcEgr-hp53,并研究其体外稳定转染联合X射线照射对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其凋亡的影响.方法将野生型p53cDNA全长插入pcDNA3.1质粒的多克隆位点,用Egr-I的启动子替代pcDNA3.1质粒的CMV启动子,构建成pcEgr-hp53重组质粒;通过脂质体介导转染法将重组质粒pcEgrhp53和pcDNA3.1分别转染入SKOV3细胞株,细胞株命名为SKOV3-hp53及SKOV3-vect,并经G418筛选稳定克隆并扩增培养,两组接受不同剂量X射线照射,观察其对肿瘤细胞生长及其凋亡的影响.结果经限制性内切酶酶切鉴定,辐射诱导表达载体pcEgr-hp53构建正确,稳定转染pcEgr-hp53联合X-射线照射可明显抑制肿瘤细胞的增殖,并诱导肿瘤细胞凋亡.结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pcEgr-hP53,体外基因-放射联合治疗诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,具有显著的肿瘤抑制作用.本研究将为提高临床恶性肿瘤放疗疗效奠定了理论和实验基础.

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