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  • pcEgr-hp53稳定转染联合X射线诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达变化

    作者:董丽华;许一多;刘锋;龚守良

    目的:探讨辐射诱导表达载体pcEgr-hp53体外稳定转染人肺腺癌A549细胞后联合X射线照射,诱导细胞凋亡的作用及相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白表达的变化.方法:以脂质体介导携有外源野生型p53基因的辐射诱导表达载体pcggr-hp53和pcDNA3.1,体外转染A549细胞,筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养,所表达的A549-hp53和A549-vect分别接受0,0.5、2和5 Gy X射线照射,即8个实验组,采用TUNEL法和流式细胞术检测稳定转染联合辐射对细胞凋亡和Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白表达变化的影响.结果:A549-hp53组加不同剂量照射与0 Gy组比较,其百分数均明显增加(0.5~5 Gy,P<0.05~P<0.01),Bcl-2蛋白表达在0.5~5Gy时明显下降,而Bax蛋白明显增加(P<0.05~P<0.01),caspase-3蛋白表达在2~5 Gy时明显增加(P<0.01);A549-hp53照射组不同剂量照射,与A549-vect相应照射剂量组比较,其百分数在0.5 Gy时无明显差异,在2~5 Gy时为(P<0.01),Bel-2蛋白表达明显下降(0.5 Gy,P<0.01;2~5 Gy,P<0.05),Bax和caspase-3蛋白表达0.5~5 Gy时明显增加(P<0.05~P<0.01).结论:体外p53基因转染联合X射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡明显增多,凋亡相关蛋白Bcl-2表达下调,Bax、caspase-3表达上调,具有显著的肿瘤抑制作用.

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