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  • 人可溶性IL-6R及其突变体基因在COS7细胞中的表达及活性分析

    作者:宋伦;任蕴芳;王建安;沈倍奋

    目的:研究人可溶性IL-6R(hsIL-6R)的空间构效关系,为小分子拮抗剂设计提供理论依据.方法:首先利用PCR技术扩增天然人sIL-6R基因片段,然后将第280位His残基突变成Ile.天然基因和突变体基因分别转染COS7细胞,经ELISA和Western blot检测证实转染细胞上清中的表达产物,并利用Binding assay ELISA和生物学功能分析法检测表达产物与IL-6的结合能力以及它们所介导的IL-6信号转导功能的差异.结果:突变体H280I比天然sIL-6R具有更高的IL-6结合能力,但拮抗IL-6在两种效应细胞系上的信号传递功能.结论:第280位His残基对sIL-6R发挥正常生物学功能具有重要影响,是符合拮抗剂设计要求的一个很好的候选位点.

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