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Western blotting免疫印迹法文献资料
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TSHR蛋白表达质粒的构建和TSHR蛋白的表达
目的:为获得足量的TSHR蛋白及建立Graves'病的动物模型.方法:将构建于pCRTM3中的TSHR cDNA经限制性内切酶处理后,重新构建于表达型载体PinPoint X质粒中,经酶切分析和PCR检测,并在E.coli JM109中表达,Western blotting免疫印迹法检测其免疫活性.结果:证明TSHR cDNA基因正确地重组于PinPoint X中,并在E.coli JM109中表达, 12%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定表达产物TSHR蛋白分子量为107 kD,Western blotting免疫印迹法证实其具有免疫活性.结论:已成功地重组了TSHR的表达质粒,并得到了有相应免疫活性的TSHR蛋白.