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蛋黄及其提取物中唾液酸糖肽的分离与测定
目的 建立唾液酸糖肽(sialylglycopeptide,SGP)的HPLC分析法,并优化双唾液酸糖肽(dualsialylglycopeptide,d-SGP)的提取工艺.方法 分别采用Hilic亲水色谱柱、C18反相色谱柱和季胺型阴离子交换色谱柱三种不同类型 HPLC色谱柱,优化H PLC洗脱条件,对SGP粗品进行分析测定,考察d-SGP和单唾液酸糖肽(mono-sialylglycopeptide,m-SGP)的分离效果,并从峰型、保留时间、对称性、分离度四个方面来评价色谱柱对SGP样品的分离效果.优选出合适的色谱柱,建立d-SGP的定量方法,继而采用单因素试验,以d-SGP提取率为指标,以提取次数、料液比、搅拌时间为优选因素,优化提取工艺.结果 在优化的色谱条件下,Hilic亲水色谱柱和季胺型阴离子交换色谱柱对d-SGP和m-SGP具有较好的分离效果,而C18反相色谱柱的分离效果较差.优化后的佳提取工艺是以体积分数为60%的乙醇水溶液每次搅拌时间为60 min,料液比为1∶5,提取3次,d-SGP的提取率较高、重现性较好.结论 Hilic亲水色谱柱对SGP样品的分离效果好.优化后的d-SGP的提取工艺稳定可行.
关键词: Hilic柱-高效液相色谱法 唾液酸糖肽 单唾液酸糖肽 单因素法