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高糖对牛视网膜微血管内皮细胞损伤的实验研究
目的利用体外培养的牛视网膜微血管内皮细胞来观测高浓度葡萄糖在细胞的损伤中所起的作用.方法体外培养牛视网膜微血管内皮细胞.通过MTT(四唑氮盐)法及3H -TDR掺入法研究高糖对牛视网膜微血管内皮细胞的损伤作用.结果内皮细胞在含高糖(28、40 mmol/L)DMEM培养基及不同培养时间(2d、7d)下MTT测定结果与对照组(生理浓度葡萄糖,5.5 mmol/L)比较有显著性差异P＜0.05,3H -TDR掺入法研究结果显示高糖对视网膜微血管内皮细胞的增殖有明显抑制作用,亦呈剂量及时间依赖性损伤细胞.结论高浓度葡萄糖对牛视网膜微血管内皮细胞有显著的损伤作用.
关键词： 牛视网膜微血管内皮细胞 高糖 损伤 -
维生素B1对高糖所致牛视网膜微血管内皮细胞损伤的保护作用
目的:研究维生素B1(thiamine)通过改变糖酵解和细胞复制对高浓度葡萄糖所致体外培养的牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)损伤的保护作用,探讨维生素B1的保护作用.方法:取2～3代体外培养的牛视网膜微血管内皮细胞,将培养板上的细胞随机分为4组,DMEM培养基含不同葡萄糖浓度(5.5,20.0mmol/L),同时分别加与不加维生素B1(150μ mol).7d后检测细胞活力和上层培养液中的LDH的含量;3H-TdR掺入法测定DNA合成以及流式细胞仪测定牛视网膜微血管内皮细胞细胞周期,观察高糖对牛视网膜微血管内皮细胞的损伤作用并观察维生素B1对其的保护作用.结果:与正常组(葡萄糖5.5mmol/L)相比,高糖组(葡萄糖20.0mmol/L)的细胞活力明显降低,培养液中的LDH含量显著增加,细胞DNA合成减少,细胞凋亡率增加.而加入维生素B1(150μ mol)能够显著降低细胞的损伤程度.结论:高浓度葡萄糖对牛视网膜微血管内皮细胞有显著的损伤作用,维生素B1能减轻高糖对内皮细胞的损伤,其保护作用可能是通过改变糖酵解和细胞复制来实现的.
关键词： 牛视网膜微血管内皮细胞 高糖 维生素B1
