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中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1表达的研究
目的通过研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒(HCMV)感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1蛋白丰度变化的影响,探讨中药金叶败毒制剂体外对HCMV感染的阻断和治疗效应及其机制.方法 2002年11月至2004年4月华中科技大学同济医学院附属同济医院采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测HCMV感染后24h、48h、72h、96h细胞中p21WAF1/CIP1丰度,检测中药金叶败毒制剂干预后p21WAF1/CIP1丰度的变化.结果病毒感染后24h、48h、72h、96h细胞中p21WAF1/CIP1丰度呈下降趋势,而中药金叶败毒制剂可部分阻止这种趋势.结论中药金叶败毒制剂部分上调HCMV感染引起的p21WAF1/CIP1丰度下降,可能是中药金叶败毒制剂抗HCMV效应的作用机制之一.
关键词： 中药金叶败毒制剂 人巨细胞病毒 p21WAF1/CIP1 -
中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞kip1基因转录水平的影响
目的 研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒(HCMV)感染细胞细胞周期调控抑制基因kip1转录水平的影响,探讨中药金叶败毒制剂体外对HCMV感染的阻断机制.方法 2005年7月至12月于南方医科大学南方医院,采用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测HCMV感染后24h、48h、72h、96h细胞中kip1 mRNA水平,检测中药金叶败毒制剂干预后kip1 mRNA水平的变化.结果 病毒感染后24h、48h、72h、96h细胞中kip1 mRNA水平呈下降趋势,而中药金叶败毒制剂可部分阻止这种趋势.结论 中药金叶败毒制剂部分上调HCMV感染引起的kip1 mRNA水平下降,可能是中药金叶败毒制剂抗HCMV效应的作用机制之一.
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中药金叶败毒制剂抑制巨细胞病毒感染ERK/MAPK信号通路的研究
目的:通过对感染丝裂素活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase包括ERK1和ERK2)的信号通路的抑制作用,研究中药金叶败毒制剂治疗巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染的分子机制.方法:使用免疫印记技术检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(ganciclovir,GCV)干预HCMV感染的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung,HEL)的ERK表达水平,并观察MEK(mitogen-activated protein kinase kinase)特异性抑制剂PD 98059,中药金叶败毒制剂对细胞的病变作用(cytopathic effect,CPE)的影响.结果:两种药物都可抑制HCMV在HEL中的增殖,以PD 98059与中药金叶败毒制剂合用效果明显.中药金叶败毒制剂使磷酸化ERK1/2表达降低,对ERK1的抑制作用在感染后10min出现,30min达到高峰,对ERK2的抑制作用在感染后10min出现,60min达到高峰,而GCV对ERK1/2无明显的抑制作用.结论:中药金叶败毒制剂可通过调节MAPK/ERK通路而抑制HCMV基因的表达和复制从而发挥其部分抗病毒作用.
