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抑制缺氧诱导因子1α对人宫颈癌细胞生长和侵袭的影响研究
目的 探讨缺氧诱导因子1 α(HIF-1α)对宫颈癌细胞的生物学行为的影响.方法 选用Hela细胞、空载体EGFP-C1转染Hela、EGFP-HIF-1α反义Hela细胞,在37℃,5％C02,1％O2培养环境中培养细胞对照;通过Western blotting检测各组细胞内HIF-1α蛋白表达,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率、软琼脂克隆形成方法观察各组细胞的增殖、Transwell侵袭小室方法观察各组细胞的侵袭能力的改变.结果 蛋白免疫印迹结果显示,在低氧环境中Hela细胞和仅转染EGFP-C1质粒的Hela细胞中有HIF-1α蛋白的表达条带,而EGFP-HIF-1α反义Hela细胞无表达.并且在低氧环境中EGFP-HIF-1α反义Hela细胞与Hela细胞和仅转染EGFP-C1质粒的Hela细胞相比,其细胞的凋亡率增加、细胞的侵袭能力及细胞集落的形成被抑制,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 HIF-1α能够对宫颈癌Hela细胞的恶性生物学行为产生影响,包括抗凋亡、促增殖、侵袭转移等,且在体外抑制HIF-1α的表达对宫颈癌细胞的凋亡有抑制作用.
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miR-101靶向甲基化转移酶3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭
背景与目的：miR-101在胃癌、结肠癌、乳腺癌以及前列腺癌中表达下调，有类似抑癌基因样作用，然而，其在卵巢癌中的作用尚未明确。该研究旨在探讨miR-101是否通过靶向调控甲基化转移酶3A(DNMT3A)抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭，从而进一步揭示miR-101的抑瘤机制。方法：采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测22例卵巢癌组织及癌旁正常卵巢组织中miR-101的表达改变；将miR-101 mimics转染于卵巢癌SKOV3细胞，以DNMT3A siRNA为阳性对照，采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测外源过表达miR-101对DNMT3A蛋白表达水平的影响；采用噻唑蓝(thiazolyl blue，MTT)和Transwell侵袭实验检测外源高表达miR-101对人卵巢癌细胞生长与侵袭能力的影响。结果：qRT-PCR检测结果显示，miR-101在22例卵巢癌组织中的表达水平较癌旁正常组织明显下调；Western blot检测结果显示，外源过表达miR-101或沉默DNMT3A能下调SKOV3细胞DNMT3A蛋白的表达水平；MTT检测结果显示，转染miR-101 mimics或沉默DNMT3A 48、72和96 h后D值与对照组比较明显减少，差异均有统计学意义(P<0.05)；Transwell侵袭实验显示，转染miR-101 mimics或沉默DNMT3A 36 h后穿过基底膜的细胞数分别为(105±7)个和(107±13)个，与对照组(213±11)个比较能明显减缓SKOV3细胞的穿膜能力，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-101通过靶向调控DNMT3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭。
