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帕金森病大鼠移植神经元存活与白藜芦醇浓度的量效作用
目的:观察经白藜芦醇培养的胚鼠腹侧中脑组织移植至帕金森病大鼠模型脑纹状体神经元的凋亡情况,同时探讨白藜芦醇浓度的影响.方法:实验于2004-03/2006-01在南京中医药大学解剖实验室完成.①用神经毒剂6-羟基多巴胺单侧损毁SD大鼠左侧中脑被盖腹侧区和黑质致密部建立帕金森病动物模型.②实验分为白藜芦醇培养组和对照组.白藜芦醇培养组又分为3个亚组:20,40,60 mg/L组,每组各9只,分别将胚鼠腹侧中脑组织预置于20,40,60 mg/L白藜芦醇培养液中;对照组9只,将腹侧中脑组织预置于DMEM营养液中.③预置12 h后移植至大鼠左侧纹状体尾壳核头部.④于移植后5,10,15 d将动物处死,采用原位末端标记法结合流式细胞术及免疫组织化学方法对移植神经元凋亡和存活情况进行定量分析.结果:①脑纹状体组织观察酪氨酸羟化酶免疫组织化学结果:白藜芦醇培养组和对照组纹状体移植针道和针道周围都可见大量酪氨酸羟化酶阳性细胞;细胞计数显示白藜芦醇培养组的酪氨酸羟化酶阳性细胞数量较对照组多(P＜0.01);白藜芦醇培养组中,40 mg/L白藜芦醇组中的存活的酪氨酸羟化酶阳性细胞数量较20 mg/L组和60 mg/L组多([5 d:(4 804.77±427.37)比(3 069.89±148.95),(3 038.20±118.95)个/200倍视野;10 d:(4 608.97±274.64)比(2 850.83±48.06),(2 875.92±210.54)个/200倍视野;15 d:(4 217.42±325.93)比(2 623.39±350.68),(2 568.39±49.67)个/200倍视野;P＜0.01].②脑纹状体组织观察原位末端标记法结果:白藜芦醇培养组较对照组移植神经元凋亡细胞数减少;白藜芦醇培养组中,40 mg/L白藜芦醇组中的凋亡细胞数量少于其他两组(P＜0.01).③脑纹状体组织流式细胞仪检测结果:白藜芦醇培养组较对照组移植神经元凋亡率降低.结论:白藜芦醇具有促移植神经元存活作用,作用效果与培养液中自藜芦醇含量有关.
