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悬浮转染文献资料
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脂质体介导转染N2a细胞的优化方法
背景：阳离子脂质体介导的细胞转染具有结果可靠、可重复性强的特点，但面临一个共同的缺点，就是转染效率常较低。
目的：探讨阳离子脂质体转染N2a细胞(小鼠神经胶质瘤细胞)的优化方法。
方法：采用24孔培养板，1.5μL阳离子脂质体Lipofectamine?LTX介导，通过贴壁法和悬浮法，将500 ng带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组质粒pcDNA3-GFP转入N2a细胞，倒置荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白表达情况，并比较二者转染效率。采用悬浮转染法，将500 ng质粒DNA分别用1.0，1.5，2.0，2.5μL Lipofectamine?LTX进行转染，探讨适脂质体和DNA比例。
结果与结论：1.5μL脂质体/500 ng DNA，悬浮法转染效率显著高于贴壁法转染效率(P<0.01)；1.0，1.5，2.0，2.5μL Lipofectamine?LTX对500 ng质粒DNA的转染效率分别为(76.60±3.85)%，(80.00±4.17)%，(88.00±5.89)%，(54.96±4.23)%，提示脂质体2.0μL与质粒DNA 500 ng的转染效率高。
