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细胞周期抑制蛋白p27kip1和周期蛋白表达与大肠癌发生预后
目的探讨细胞周期调控抑制因子 p27kip1蛋白和周期蛋白 E(cyclinE)在大肠腺癌发生发展中的作用.方法采用免疫组化技术 SP法,检测 p27kip1和 cyclinE蛋白在 37例大肠腺癌和 26例正常大肠黏膜组织中的表达.结果 p27kip1蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为 45.9% , 显著低于正常大肠黏膜组织 (χ 2=4.590, P< 0.05),并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 (χ 2=9.653, χ 2=6.838, P< 0.05); cyclinE蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为 64.9%,显著高于正常大肠黏膜组织 (χ 2=4.285, P< 0.05) , 并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 (χ 2=8.397,χ 2=5.261, P< 0.05); p27kip1蛋白阳性表达组 cyclinE蛋白阳性表达率低于 p27kip1蛋白阴性表达组,但两者无相关( r=- 0.1133, P >0.05).结论 p27kip1蛋白的低表达和 /或 cyclinE蛋白的高表达在大肠腺癌发生中发挥重要作用,并可能有助于预测其恶性程度及淋巴结转移,可能对大肠腺癌的治疗和生活质量的改善有指导作用.
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RNAi cyclin E对肝癌细胞生长的影响
目的:探讨RNAi cyclin E对肝癌细胞生长的影响.方法:肝癌细胞系HepG2采用体外培养,选取siRNA合成双链发卡样DNA;将其重组入pGFP-V-RS得到重组子pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122:两重组子分别进行DNA序列测定、同源性比较;将两重组子和pGFP-V-Con分别转入人肝癌HepG2细胞中,同时设空白对照组(不转染任何质粒,仅加转染试剂).检测4组HepG2细胞cyclin E mRNA表达情况及细胞的增殖情况.结果:经过同源性检索和优选确定cyclin E基因的siRNA载体pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122;干扰1组(转染pGFP-V-RS-siCE951)和干扰2组(转染pGFP-V-RS-siCE1122)细胞cyclin E mRNA的相对表达量显著低于空白对照组和无关siRNA对照组(P＜0.05);干扰1组和干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组比较,在3、4、5d细胞孔内的吸光度值显著减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:siRNA载体pGFP-V-RS-siCE951和pGFP-V-RS-siCE1122转染人肝癌HepG2细胞能显著降低细胞cyclin E基因的表达,是理想的siRNA靶区段.抑制肝癌HepG2细胞cyclin E基因表达,可以降低肝癌HepG2细胞的生长速度.
