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兔骨髓间充质干细胞与异体脱细胞耳软骨支架的体外复合
背景 耳软骨作为脱细胞基质可选择的支架,进行脱细胞处理可去除了软骨细胞的抗原性,从而与种子细胞具有良好的相容性.目的 体外提取、培养兔骨髓基质干细胞,并与异体脱细胞耳软骨支架复合,观察其生物相容性.方法 提取兔骨髓间充质干细胞行体外培养,诱导为软骨细胞,以胰蛋白酶-曲拉通联合法获得脱细胞软骨支架,将两者于体外复合,10 d 后复合支架固定行组织学染色及扫描电镜观察.结果 与结论 兔骨髓间充质干细胞体外诱导14 d 可形成软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫细胞化学示胞浆呈棕黄色;兔耳软骨脱细胞基质呈乳白色,组织学染色及扫描电镜观察示经脱细胞后支架孔隙均匀,结构完整,仍保存大量酸性黏多糖及胶原成分.其孔径长度(33.70±4.33) μm,孔隙率(65.23±7.35)%.复合支架组织学染色及扫描电镜示两者黏附良好,并伴有多量基质分泌.说明兔骨髓间充质干细胞诱导为软骨细胞与异体脱细胞耳软骨有良好的生物相容性.
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β-TCP-HA-AC-BMSCs复合体修复兔膝关节骨、软骨缺损的实验研究
目的 观察磷酸三钙人工骨( β-TCP)-透明质酸(HA)-脱细胞耳软骨(AC) -骨髓间充质干细胞(BM-SCs)复合体修复兔膝关节骨、软骨缺损的效果.方法 获取新西兰大白兔BMSCs,体外诱导成软骨细胞并培养,取异体兔耳软骨并进行脱细胞处理,并与β-TCP- AC结合形成复合物接种软骨细胞.取6月龄新西兰大白兔12只,手术制备膝关节缺损模型,并随机分为A、B两组.A组(8只)缺损区植入β-TCP-AC-BMSCs,并于关节腔内注入HA；B组(4只)缺损空置作为空白对照.结果 BMSCs在体外生长稳定,增殖能力强,可被诱导为软骨细胞.第16周,A组缺损区内充填白色半透明新生软骨组织,色泽与正常软骨相似,质韧,表面平整,与正常软骨界限消失,表面细胞平行于关节面,深层细胞排列紊乱,细胞呈团状,基质异染广泛,与周围正常软骨连接良好.B组缺损区未修复,底部为白色纤维组织.结论 β-TCP-HA-AC-BMSCs复合体修复兔膝关节骨、软骨缺损效果良好.
