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  • 去细胞组织工程异种瓣膜支架制备方法的比较

    作者:王鹏;李超;张润起;谈磊;孔凡华

    背景:采用何种去细胞方法以获取良好的低抗原异种生物瓣膜支架是构建组织工程瓣膜的前提.目的:通过测试不同脱细胞方法的效果及保留脱细胞支架的能力米探讨异种组织工程心脏瓣膜生物支架的佳制备方法.设计、时间及地点:前瞻性随机对照实验,于2007-01/2008-06在泰安市中心医院中心实验室完成.材料:16个新鲜猪主动脉瓣分为4组,对照组,NaCl-SDS组、胰蛋白酶组、曲拉通组,每组4个.方法:对照组未经去细胞处理,3个实验组分别用NaCI、胰蛋白酶、Triton-100脱细胞处理.主要观察指标:各种方法处理后的猪心脏瓣膜支架大体标本结构,光学和电子显微镜观察超微结构.采用免疫组化法检测血管内皮细胞MHC-Ⅰ类抗原的表达.结果:NaCI-SDS法脱细胞处理的瓣膜内皮细胞去除不彻底,细胞外基质的三维网状结构虽完整但纤维模糊,肿胀.胰蛋白酶法处珲的瓣膜内皮细胞基本去除,但瓣膜支架结构改变很明显,胶原纤维肿胀,边缘毛糙,纤维网状间隙增宽、不规则.曲拉通法处坪的瓣膜内皮细胞去除彻底,支架结构保存完好.NaCI-SDS法、胰蛋白酶法和曲拉通法脱细胞后的瓣膜均存在一定的免疫原性,但用胰蛋白酶法和曲拉通法脱细胞后的瓣膜支架所表达的免疫原性较NaCI-SDS法显著降低.结论:应用曲拉通法制作的瓣膜支架去内皮细胞较为彻底,不改变瓣叶支架结构,而且免疫原性小.

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