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可吸入物质文献资料
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人肺癌A549细胞直接暴露可吸入物质体外试验方法的建立及应用
目的 建立人肺癌A549细胞直接暴露可吸入物质体外试验方法并进行初步的应用.方法 将二氧化氮气体用洁净空气稀释后分别配制成5.1、10.7、15.0、20.7 mg/m3,在多孔膜上生长的A549细胞放置在水平扩散染毒仓内,通过气液界面技术(ALI)暴露于不同浓度的二氧化氮气体,15 ml/min,37℃染毒1h,利用MTT和NUR试验检测细胞毒性;采集不同工况下的汽油发电机尾气,10 ml/min,37℃染毒A549细胞15 min,利用CCK-8和MTT试验检测细胞毒性.结果 细胞存活率随着NO2气体浓度的升高(5.1 ～20.7 mg/m3)显著降低(P＜0.05),并且呈剂量-效应关系(MTT拟合曲线:yMTT =0.989-0.021xNO2R2=0.84,P＜0.01;NUR拟合曲线:y NUR=1.032-0.026xNO2 R2=0.88,P＜0.01).怠速(冷启动)、53％和100％负荷下,A549细胞MTT和CCK-8存活率显著低于空气暴露组(P＜0.05).结论 体外细胞直接暴露可吸入物质方法可以应用于有害物质的体外吸入毒性研究,对工业和环境场所中的有害物质的毒性评价提供了新的技术和方法.
