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Wnt信号通路在ALDH1A1影响胃癌细胞生物学行为中作用
目的 探讨乙醛脱氢酶1A1(ALDH1 A1)基因表达对胃癌细胞的生物学行为影响及机制.方法 通过脂质体将shRNA-ALDH1 A1载体转染到胃癌MKN-45细胞,48 h后,采用RT-PCR及蛋白印迹(WB)法检测转染后MKN-45细胞中ALDH1 A1蛋白及mRNA表达;四唑盐(MTr)法检测细胞活力;Transwell法检测胃癌细胞迁移及侵袭能力;WB检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及Wnt/β-catenin信号通路表达情况.结果 shRNA-ALDH1 A1转染组MKN-45细胞中ALDH1 A1蛋白及mRNA表达量[分别为(0.09±0.01)、(0.08±0.01)]明显低于对照组[分别为(0.89 ±0.09)、(0.48±0.05)];shRNA-ALDH1A1组MKN-45细胞活力(0.40±0.04)低于对照组(0.73 ±0.07),细胞迁移、侵袭数目[分别为(39.78±3.24)、(42.53±4.25)个/视野]少于对照组[分别为(98.86 ±9.03)、(90.52 ±9.14)个/视野];shRNA-ALDH1 A1组MKN-45细胞中MMP2、MMP9、Wnt1、Wnt5a及β-catenin表达水平[分别为(0.10±0.01)、(0.10±0.01)、(0.28±0.03)、(0.12 ±0.01)、(0.19 ±0.02)]明显低于对照组[分别为(0.49 ±0.04)、(0.95±0.09)、(1.29 ±0.12)、(0.52 ±0.04)、(0.56±0.05)],差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 ALDH1A1基因沉默可明显降低胃癌细胞MKN-45活力、抑制细胞迁移、侵袭能力,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.
