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洗手产品除病毒效果离体实验方法研究
目的 建立一种安全、简便和费用低廉的测试洗手及洗手产品除病毒效果的离体试验方法.方法 以噬菌体为替代病毒,仿真皮为载体设计试验流程,分析影响试验结果的要素,通过数据分析,研究洗手产品回收稀释液种类、噬菌体初始接种浓度及回收方式对结果稳定性的影响.使用不同洗手产品对多种噬菌体分别进行除病毒效果测试后进行统计分析,确定方法的适用性.结果 以噬菌体φX174为污染病毒,0.1％蛋白胨生理盐水做为香皂和洗手液的回收稀释液使用时,其噬菌体的回收值为5.57和5.54,明显高于改良李氏肉汤吐温培养基(MLBT)、多用中和剂(PVUN)及磷酸缓冲液(PBS);对手摇瓶子2min、摇床200 r/min振摇2min、均质器标准强度快速拍打2min后测得的噬菌体回收量进行单因素方差分析,P0.05=0.72,表明3者无统计学差异,但是在使用均质器拍打时的变异系数(CV)为0.74％小,数据稳定;4个初始接种浓度中,只有在107 pfu/mL与108 pfu/mL的浓度下,平皿上的噬菌体数量符合实验设计,超过4 Log10,对这2个浓度实验结果进行t检验,其P0.05=0.003,结合回收数据,认为108pfu/mL是合适的加样浓度;使用上述参数,分别以噬菌体MS2、0X174、φ6为污染病毒,使用香皂、洗手液及清水进行洗手除病毒评价,所有结果CV均＜15％.结论 采用108 pfu/mL的噬菌体悬液污染仿真皮后使用洗手产品模拟洗手,均质器拍打2 min、0.1％蛋白胨生理盐水进行回收稀释,实验结果稳定.多次重复实验结果显示,该方法适用于多种噬菌体,也适用于多种洗手产品,是一种简单可行的洗手及洗手产品除病毒效果评价方法,具有较高的应用价值.
