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  • PCR产物生物发光分析技术研究

    作者:舒柏华;王胜利;何丽芸;徐顺清

    目的 基于水母发光蛋白生物发光分析技术建立一种PCR产物定量检测技术.方法 利用RT-PCR对CK19-mRNA进行放大,PCR引物的5'端用生物素标记,然后用交联了地高辛寡核苷酸探针与目标生物素化的DNA模板杂交.杂交复合物与包被在微孔板上的链亲合素结合,加入标记了水母发光蛋白的地高辛抗体与地高辛特异结合,再加入钙离子激发水母发光蛋白发光,发光强度正比于CK19-mRNA的量.结果 探测灵敏度可达22 amol/L的RT-PCR产物.结论 该定量检测技术是一种灵敏的、可靠的、非放射性的微量CK19-mRNA定量方法.

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