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  • 有机磷杀虫剂对M2受体磷酸化的影响

    作者:邹黎明;Carry POPE

    目的研究有机磷类杀虫剂对G蛋白结合受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体磷酸化的影响和可能存在的其他作用途径.方法将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p32]ATP与对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果.结果氧毒死蜱完全抑制m2受体的磷酸化,其半数抑制浓度为(IC50)70μmol/L;毒死蜱也抑制m2受体的磷酸化,而对氧磷与对硫磷不抑制m2受体的磷酸化.结论不同的有机磷杀虫剂对m2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断m2受体的磷酸化,提示有机磷杀虫剂的毒性作用存在其他途径.

  • 有机磷类杀虫剂对毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响

    作者:邹黎明;李舒音;CARRY Pope

    目的:研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体磷酸化的影响,进一步揭示有机磷类杀虫剂可能存在的其他作用途径.方法:利用亲和层析方法从猪脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱M2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体,G蛋白结合受体激酶-2,[γ-p32]标记的ATP与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳,凝胶片干燥后放射性自显影检测M2受体磷酸化结果.之后将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化M2受体蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数.结果:氧毒死蜱(CPO)完全抑制毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化,其IC50为70 μM;毒死蜱(CPF)也抑制M2受体的磷酸化,而对氧磷(PO)与对硫磷(parathion)不抑制M2受体的磷酸化.结论:不同的OPs对GRK2介导的毒蕈碱乙酰胆碱M2受体的磷酸化有完全不同的作用;毒死蜱阻断M2受体的磷酸化,提示OPs的毒性作用存在其他的可能作用途径.

  • 有机磷类杀虫剂存在其他作用靶分子

    作者:邹黎明;赵国安;李舒音

    目的:研究有机磷类杀虫剂对大鼠脑G蛋白偶联受体激酶2介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体磷酸化的影响,揭示有机磷类杀虫剂存在的其他作用靶分子或作用途径.方法:制备亲和层析柱;利用亲和层析方法从大鼠脑中纯化毒蕈碱乙酰胆碱m2受体;将纯化的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体或β-肾上腺素受体,G蛋白偶联受体激酶-2,[γ-p32]ATP与对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,放射性自显影检测m2受体磷酸化结果.结果:氧毒死蜱完全抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,其半数抑制浓度为(IC50)70μmol/L;对氧磷不抑制m2受体的磷酸化;氧毒死蜱和对氧磷都不抑制β-肾上腺素受体的磷酸化.结论:氧毒死蜱有选择性地抑制大鼠脑m2受体的磷酸化,说明某些有机磷杀虫剂的毒性作用存在其他靶分子或作用途径.

  • 某些有机磷杀虫剂影响乙酰胆碱M2受体磷酸化的实验研究

    作者:邹薇薇;李继;邹黎明

    目的 研究有机磷类杀虫剂(OPs)对G蛋白结合受体激酶-2(GRK-2)介导的毒蕈碱乙酰胆碱m2受体(mAChR2)磷酸化的影响,进一步揭示OPs可能存在的其他作用途径.方法 将纯化的大鼠脑mAChR2,GRK-2,同位素磷32标记的三磷酸腺苷([γ-P32]ATP)与不同浓度的对氧磷(PO)、氧毒死蜱(CPO)和毒死蜱(CPF)共同保温,聚丙烯酰胺凝胶电泳.凝胶片干燥后放射性自显影检测mAChR2磷酸化结果.将干燥凝胶片中放射性标记的磷酸化mAChR2蛋白带剪下,同位素液体闪烁计数器计数.结果 CPO抑制大鼠脑mAChR2的磷酸化,其IC50为70?mol/L;CPF也抑制mAChR2的磷酸化.而PO与对硫磷(PT)不抑制mAChR2的磷酸化.CPO和CPF并不抑制同样由GRK2介导的β2肾上腺素受体(β2-AR)的磷酸化.结论 CPO和CPF选择性地抑制GRK-2介导的mAChR2磷酸化,而PO和PT无此效应.说明某些有机磷类杀虫剂可能存在其它作用靶分子.

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