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十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)文献资料
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鲤鱼主要变应原的分离、鉴定与纯化
目的 对常见的食物过敏原鲤鱼进行特异性抗原成分的分离、鉴定和纯化,为临床诊断及治疗鲤鱼过敏症提供理论依据.方法 通过磷酸盐缓冲溶液进行提取、用十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离出多种蛋白组分并测定其分子量;采用蛋白印迹技术(Western-blotting)鉴定其变应原并通过DE52离子交换层析对鲤鱼变应原进行初步纯化,进一步经凝胶过滤层析对变应原混合组分进行纯化.结果 SDS-PAGE分离出14种蛋白组分,其中主带有9条,分子量分别为5,46,36,34,26,25,23,20,16 kDa.Western-blitting结果显示,鲤鱼的主要变应原及次要变应原的分子量是42,36 kDa的变应原组分.结论 鲤鱼主要特异性变应原为42和36 kDa的蛋白质,为临床诊断和治疗鱼类过敏性疾病提供标准化的应原奠定了基础.
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带鱼过敏原的分离、鉴定与纯化
目的 分离、鉴定和纯化带鱼特异性过敏原.方法 采用Coea's提取液提取带鱼蛋白;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blotting分析其中的过敏原;阴离子交换层析对过敏原进行分离纯化.结果 带鱼粗浸液蛋白分子量在8～130 kDa之间:Western-blotting检测到分子量为12、18、25、27、29、34、38、54和60 kDa的过敏原蛋白:通过离子交换层析分离得到较纯的分子量为18、38 kDa的过敏原蛋白,且具有免疫活性.结论 发现了带鱼中多种过敏原,并对2种过敏原分离纯化,为带鱼过敏的诊断和治疗奠定了理论基础.
