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  • 间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48基因特点

    作者:王冰;刘军;冯辉;孟红蕊;曹雅明

    目的 阐明问日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原编码基因Pvs48的特点.方法 采集我国疟疾高发混合流行区云南省问日疟患者指尖血样本,制备血样干滤纸片提取疟原虫基因组DNA;聚合酶链反应(PCR)扩增Pvs48;双脱氧链终止法测序.并对测序结果进行序列多态性分析.结果 共成功扩增16例间日疟原虫分离株Pvs48基因.与间日疟原虫标准株Sa1-I比较,检测出6处错义突变位点,导致6处氨基酸置换和3种基因型、3种氨基酸型.结论 我国间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48编码基因相对保守,不同地理株间差异无统计学意义.有限的基因突变再次提示以Pvs48为基础构建的传播阻断疫苗在我国具有广泛应用的可行性.

  • 我国间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48基因特点分析

    作者:刘军;冯辉;郑丽;凌静;朱晓彤;曹雅明

    目的明确我国疟疾流行区间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48基因特点.方法收集疟疾单纯流行区浙江、湖北两省间日疟患者血样,制备血样干滤纸片;提取疟原虫基因组DNA;聚合酶链反应(PCR)扩增Pvs48基因;Sanger双脱氧链终止法测序并分析. 结果成功扩增12例间日疟原虫分离株Pvs48全长基因.与间日疟原虫标准株Sal-Ⅰ比较,检测出6个错义突变位点,导致6处氨基酸置换和6种基因型.结论我国间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs48具有保守性.

  • 间日疟原虫云南分离株传播阻断疫苗候选抗原Pvs 28基因多态性分析

    作者:冯辉;郑丽;刘军;杨毅梅;曹雅明

    目的分析我国疟疾混合流行区云南分离株间日疟原虫(P.v)传播阻断疫苗候选抗原 Pvs 28基因特点.方法收集云南省血样17份;提取疟原虫基因组DNA;PCR扩增 Pvs 28基因;基因测序;DnaSP version 4.0软件进行基因多态性分析.结果成功扩增 Pvs 28全长基因17个序列.与标准株Sal-I比较,检测出7个错义突变,7个基因型和7种氨基酸型.云南P.v分离株核苷酸多态性π值为0.0044.若不考虑重复片段拷贝数的差异,云南P.v分离株和湖北P.v分离株 Pvs 28蛋白主导氨基酸型完全一致,即V14-L52-L98-E105-L116-S140-I223.与泰国P.v分离株比较,我国主导基因型突变位点完全包含在泰国P.v分离株突变位点中.结论以Sal-I Pvs 28为基础建立的传播阻断疫苗能够克服云南P.v分离株 Pvs 28抗原多样性而发挥传播阻断作用,提示间日疟原虫传播阻断疫苗在我国具有良好的应用前景.

  • 我国云南分离株间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原pvs25基因多态性分析

    作者:刘军;冯辉;郑丽;杨毅梅;金行一;曹雅明

    目的阐明我国疟疾流行区间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原pvs25基因多态性特点.方法收集全年流行区云南省血样31份;提取疟原虫基因组DNA;聚合酶链反应(PCR)扩增pvs25基因;Sanger双脱氧链终止法测序;DnaSP version 4.0软件统计学分析.结果成功扩增pvs25全长基因31个序列.与标准株Sal I比较,检测出4个错义突变位点,5种基因型,4处氨基酸置换.C103G289C389C391 为主导基因型,L35E97T130Q131是相应主导氨基酸型,其突变与季节流行区的主导基因型和氨基酸型完全一致.核苷酸多态性π值为0.0014.组间多态性π值比较表明全年流行区明显高于季节流行区.结论我国分离株间日疟原虫传播阻断疫苗候选抗原Pvs25只有1种主导基因型和1种主导氨基酸型.有限的基因突变再次提示Pvs25是理想的候选抗原,以Pvs25为基础构建的传播阻断疫苗在我国具有广泛应用的可行性.

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