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非小细胞肺癌EMPE来源树突状细胞的分离培养
目的:建立非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)渗出性恶性胸腔积液(exudative malignant pleural effusions,EMPE)来源树突状细胞(dendritic cells,DCs)的分离培养方法,观察DCs的形态学及对其进行表型鉴定.方法:用密度梯度离心的方法,从非小细胞肺癌EMPE中分离获得胸腔积液中的单个核细胞,用白细胞介素-4(IL-4)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)培养,应用倒置显微镜、光镜观察细胞形态;用流式细胞仪对DCs进行表型鉴定.结果:建立了PEDCs的分离培养方法.培养9 d的DCs高表达人类白细胞抗原-DR(human leucocyte antigen,HLA-DR)、CD83、CD86、CD80.结论:从EMPE中分离的PEDCs体外培养后不仅在形态上成熟,而且高表达特异性表面分子.
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非小细胞肺癌EMPE来源树突状细胞的分离培养和鉴定
目的:建立非小细胞肺癌(NSCLC)渗出性恶性胸腔积液(EMPE)来源树突状细胞(PEDCs)的分离培养方法,研究PEDCs功能性抗原的表达规律.方法:用密度梯度离心的方法,从非小细胞肺癌EMPE中分离获得富含PEDCs的细胞群;用抗CD3免疫磁珠提纯PEDCs;用IL-4、GM-CSF、TNF-α,分1、2、4、8 d 4个时间段培养PEDCs;用荧光抗体标记、流式细胞仪检测不同培养时间PEDCs功能性抗原的表达.结果:建立了PEDCs的分离培养方法.培养2d PEDCs的功能性抗原HLA-ABC、HLA-DR、CD54、CD80、CD83、CDla的表达率显著升高.结论:从EMPE中分离的PEDCs,体外培养2d多种功能性抗原的表达率显著升高.
