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重组人肝细胞生长因子-β文献资料
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重组人肝细胞生长因子-β链的高效表达及包涵体纯化研究
目的构建重组人肝细胞生长因子-β链(rhHGF-β)的表达体系.筛选高效表达工程菌株,分离纯化rhHGF-β.方法用工程菌诱导培养技术筛选rhHGF-β的高效表达菌株.从诱导起始时间、诱导时间、温度、pH值、培养基组分等方面优化rhHGF-β的表达体系.进一步对rhHGF-β进行粗纯化,采用超声波破菌,溶菌酶破菌,高速离心反复洗涤获得包涵体.采用凝胶过滤层析纯化rhHGF-β.结果经十二烷基硫酸钠-多丙烯酰胺冻胶电泳(SDS-PAGE)及扫描分析目的蛋白的表达量达30%,经纯化后可获得纯度在90%以上的rhHGF-β.结论建立了高效稳定的rhHGF-β表达体系,获得实验室水平rhHGF-β的分离纯化工艺方案.
关键词: 重组人肝细胞生长因子-β 基因表达 优化 分离纯化 包涵体