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PCMV4-RC55构建文献资料
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兔透明带蛋白ZPB(RC55)DNA疫苗PCMV4-RC55的构建及其在兔的免疫反应
本实验以兔ZPB作为免疫抗原,利用DNA疫苗技术进行兔免疫避孕疫苗的研究。利用EcoRI内切酶将PGEM-RC55的兔ZP基因RC55亚克隆至pBluescript载体,再经HindIII/Xbal双酶切后,将RC55基因构建至真核表达质粒载体PCMV4,得到PCMV4-RC55。在PCMV4-RC55 DNA疫苗免疫新西兰兔的实验中,设雌兔实验组及雄兔实验组,以Bupivacaine-HCL为辅助剂进行大腿肌肉注射,24 h后在相同部位注射250 μg PCMV4-RC55 DNA,并在第4周免疫加强一次。分别于注射PCMV4-RC55前及注射后第2、4、5、6、7、8周耳静脉取血,收集血清,采用ELISA法检测新西兰兔产生抗ZP-RC55抗体水平。检测结果表明,PCMV4-RC55 DNA疫苗能诱导雌兔和雄兔产生免疫应答,抗体滴度高可达1∶8 000,滴度维持在1∶4 000水平能持续两个月以上。