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沉默Notch4基因对乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖和迁移侵袭能力的影响
目的：探讨Notch4基因对乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖、迁移侵袭能力的影响。方法：脂质体法用Notch4 siRNA转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231，RT-PCR和Western blot检测Notch4基因的表达，通过MTT实验评价MDA-MB-231细胞增殖活性的改变；流式细胞术检测细胞周期，通过Transwell实验评价肿瘤细胞迁移和侵袭能力的改变；RT-PCR方法检测Notch信号通路相关基因的变化。结果：Notch4 siRNA有效地转入细胞并抑制了Notch4基因的表达。转染Notch4 siRNA细胞的增殖活性及体外迁移侵袭能力均显著下降（P<0.05）。细胞周期阻滞在G0/G1，Hes1、Hey1、c-Myc、cyclinD1、MMP9 mRNA水平明显低于对照组（P<0.05）。结论：Notch4 siRNA可明显抑制乳腺癌细胞系MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭能力。Notch4基因可做为三阴性乳腺癌基因治疗的靶基因。
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维吾尔族饲鸽者肺患者外周血Notch4基因甲基化分析
目的 通过检测维吾尔族饲鸽者肺外周血Notch4基因甲基化程度探讨其临床意义.方法 根据纳入及排除标准连续收集2015-2016年在新疆喀什病例资料及血样标本(总纳入60例,其中20例确诊维吾尔族饲鸽者肺患者为病例组,同期20例维吾尔族饲养鸽子未发病者为阴性对照组,同期20例维吾尔族未饲养鸽子健康体检者为正常对照组.对所收集血样标本进行常规提取DNA,亚硫酸氢盐转化,PCR 扩增,体外转录和 RNase A特异性酶切,并行基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测Notch4基因甲基化情况.结果 检测Notch4片段的CpG位点总数6个(CpG_1,CpG_2/3,CpG_4,CpG_ 5,CpG_6),CpG_1,CpG_ 4,CpG_ 5,CpG_ 6在三组样本中的甲基化率分布差异无统计学意义(P>0.05).CpG_2/3在三组样本甲基化率分布差异具有统计学意义(P<0.05).病例组CpG_2/3甲基化率高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),病例组与阴性对照组CpG_2/3甲基化率差异无统计学意义(P>0.05).结论 Notch4基因甲基化通过炎症反应及信号通路调控肺纤维的发生发展.
