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电转化技术在噬菌体抗体库构建中的应用
目的:探讨电转化技术在构建噬菌体抗体库中的应用价值.方法:用国产电转化仪将重组噬菌粒p3-V2转化入E.COLI XL1-Blue中.结果:应用电转化技术构建噬菌体抗体库库容为:3.9×107单个scFv重组子,其转化效率为:107~108转化子/μg,本实验佳条件为场强(7.5 kv/cm),电容(21.0μF),细菌浓度(XL1-Blue:4.0×1010/ml),外源DNA量(p3-V2:0.6μg).结论:经优化电转化条件,所得库容符合建库要求.
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香菇C91-3 cDNA文库的构建及鉴定
目的 构建香菇C91-3 cDNA文库.方法 低速离心法收集香菇C91-3菌丝体发酵液中的菌丝,提取总RNA,巢式PCR扩增5SrRNA非转录间隔区2片段并测序鉴定.纯化mRNA,以mRNA为模板进行反转录反应;产物与pBlueScript II SK(+)载体连接,并转化E.coil DH10B,检测库容及插入片段.结果 香菇C91-3cDNA文库初始库容为7.2×106cfu,插入片段长度0.4~3.4kb,平均1.5kb.结论 成功构建香菇C91-3 cDNA文库,适合用于研究香菇蛋白的编码基因.
关键词: 香菇 cDNA文库 5SrRNA非转录间隔区2 距离树 库容 -
上犹县麻风防治55年概况
上犹县位于江西省赣州市西部,距赣州市55公里,总面积1543.87平方千米,山地面积占74%,185.03万亩,境内有湖泊,水库、山塘1639座,库容17亿立方米,经济收入主要以农业为主。全县划分为8乡6镇,131个村委会,总人口共计30.91万人。