首页 > 文献资料
-
中药对骨髓间充质干细胞增殖、凋亡及分化的影响研究进展
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenehymal stem cells,BMSCs)是一类来源于骨髓的多能干细胞,不仅能够提供造血支持,且具有自我更新、高度增殖以及多向分化的潜能,是目前干细胞研究的热点.近年来,科研人员就中药对BMSCs的影响开展了一系列的研究,发现有的中药能够促进BMSCs的增殖,有的则能够抑制其凋亡,还有的能够诱导其向成骨细胞、软骨细胞等多个方向分化.其中,部分研究还就作用机制进行了探讨,作者对其研究进展进行了概述.
-
中药对神经干细胞增殖分化信号通路的综合调控作用分析
寻找促进神经干细胞增殖与分化的有效方法是加速神经干细胞临床应用的途径之一.该文分析了近十年来中外文献关于调控神经干细胞增殖分化的中药及其作用靶点与信号通路的报道,发现中药对神经干细胞增殖分化信号通路具有综合调控作用.第一,中药能通过Notch,PI3K/Akt,Wnt/β-catenin,GFs等信号通路影响神经干细胞的增殖与分化.①黄芪、淫羊藿、龟甲、远志能通过调节Notch信号通路中的关键蛋白或基因Notch1,NICD和Hes的表达起调控作用;②人参、银杏叶、丹参能通过介导PI3 K/Akt信号通路发挥调控作用,但对该通路中上下游靶标的具体作用机制尚无研究;③姜黄、蛇床子可以上调Wnt/β-catenin信号通路中的关键靶蛋白Wnt3a及β-catenin的水平从而介导Wnt/β-catenin信号通路起调控作用;④三七、川芎可以通过促进分泌性生长因子EGF,bFGF等的表达发挥作用.第二,一些中药能通过多种途径诱导神经干细胞的增殖或分化:黄芪中的黄芪甲苷可以通过Notch信号通路调控神经干细胞的增殖或分化,但黄芪多糖含药血清又可以通过调节VEGF含量,活化PI3 K/Akt信号通路发挥作用;淫羊藿中的淫羊藿苷和淫羊藿黄酮类可以分别介导Notch或GFs信号通路来控制神经干细胞的命运转化;人参皂苷Rg1可以通过Notch和PI3K/Akt信号通路发挥调控作用;银杏内酯B可通过激活PI3 K/Akt信号通路、上调HIF-1α表达来有效调节神经干细胞凋亡相关基因和促进细胞增殖与分化,进而起到神经保护作用,而银杏叶提取物也能通过上调多种细胞因子的释放促进神经干细胞的增殖与分化;姜黄素可以通过Wnt/β-catenin与Notch信号通路来调控神经干细胞的增殖与分化.第三,信号通路的串话(cross-talk)是一些中药发挥促NSCs增殖与分化的重要途径.Notch与GFs信号通路、GFs与PI3K/Akt信号通路、Notch与Wnt/β-catenin信号通路等在调控神经干细胞的过程中相互协调,相互制约,在中药促进神经干细胞增殖或分化中发挥着关键的作用.中药对调控神经干细胞增殖分化信号通路的串话研究有待进一步加深,阐明其多靶点和多途径的作用机制与综合调控作用.
-
夏枯草愈伤组织诱导和植株再生技术的研究
目的:探讨夏枯草愈伤组织诱导和植株再生条件.方法:采用正交试验法研究不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对夏枯草愈伤组织诱导和分化的影响.结果和结论:以叶片为外植体诱导愈伤效果好,茎段次之,叶柄不能诱导出愈伤组织;6-BA是影响夏枯草愈伤组织形成的主要因素;诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+2,4-D 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖3%;宜于愈伤组织分化的培养基为1/2 MS+6-BA 3.25 mg·L~(-1)+NAA 1.25 mg·L~(-1)+蔗糖2%;佳生根培养基:MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖3%.
-
参芪扶正注射液诱导成人间质干细胞治疗脑梗塞的实验研究
目的观察参芪扶正注射液(简称参芪液)诱导成人间质干细胞(hMSCs)在脑梗塞大鼠脑内的分化及其对模型大鼠神经功能的影响.方法建立左大脑中动脉梗塞模型大鼠,将在体外扩增的hMSCs经参芪液诱导0.5h后注入模型大鼠脑内,观察hMSCs在大鼠脑内的存活、分化及对模型大鼠神经功能的改变.＃结果 hMSCs移植排斥反应低,可在大鼠脑内存活6周以上;移植前后脑梗塞面积无明显变化;免疫组化表明hMSCs在大鼠脑内表达人神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);模型大鼠的肢体运动功能和触觉功能均有改善.结论参芪液可诱导hMSCs在体内分化为神经元,hMSCs有可能成为治疗脑梗塞的理想的种子细胞.
-
丹参素定向诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的研究
目的研究丹参素体外定向诱导骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)分化为神经元样细胞.方法利用Ficoll-Paque液将骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC,体外扩增,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达.采用含丹参素的无血清L-DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞,并且探讨丹参素不同浓度及不同作用时间对MSC诱导分化为神经元样细胞的影响.以免疫组化方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果MSC在体外传代扩增后,流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD166表达阳性,CD14、CD34、CD45、HLA-DR为阴性.丹参素诱导后,MSC胞体收缩,突起伸出,呈典型的核周体形态,类似神经元;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF-M、nestin表达阳性,GFAP阴性.结论丹参素可以在体外诱导MSC分化为神经元样细胞,其诱导转化率与丹参素浓度和作用时间有关.
-
黄芪注射液通过激活鸟氨酸脱羧酶促进IEC-6细胞分化的研究
目的:观察黄芪注射液(Astragalus injection, AI)对小肠隐窝细胞株(IEC-6)增殖、分化、移行及其对细胞内鸟氨酸脱羧酶(ODC)和多胺含量的影响,探讨其粘膜修复的作用机理.方法:IEC-6细胞接种后24h,加入AI.加药后12h收获细胞,分别检测ODC mRNA水平、ODC蛋白、ODC活性及细胞内腐胺含量;24h观察细胞增殖和细胞分化;细胞接种后72h损伤细胞,并加入AI,加药后24h、48h及72h观察细胞移行.结果:AI能明显抑制IEC-6细胞增殖,促进细胞分化,对细胞移行无明显影响.AI 62.5～250μg/ml各剂量组可明显增加ODC mRNA水平,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05～0.01).AI各剂量组对ODC蛋白均无明显影响.AI随着剂量增加,逐渐升高IEC-6细胞ODC活性和腐胺含量,具有剂量依赖关系.结论:AI通过诱导IEC-6细胞ODC活性和多胺的生物合成促进细胞分化,而对细胞移行无明显作用.
-
三七总皂苷诱导造血细胞基因表达谱的体外实验研究
目的 采用cDNA芯片技术分析三七总皂苷(PNS)诱导造血细胞的基因表达谱,探讨上调基因与细胞增殖、分化的相关性.方法 选择增殖、分化相关重要的功能基因480个,制备cDNA膜芯片.人造血细胞巨核系CHRF-288、粒系HL-60和红系K562细胞经PNS处理后,分别提取mRNA,经逆转录后用[α-33P]dATP标记,与芯片的cDNA杂交.结果 PNS诱导表达上调3倍以上的基因按功能分11类,包括甲基和乙酰化转移酶、诱导分化、抑制凋亡、转录调控蛋白、周期蛋白、信号传递介导蛋白和激酶、受体、DNA和RNA聚合酶,以及大鼠肉瘤(RAS)基因家族等.PNS诱导CHRF-288、HL-60和K562细胞后,mRNA表达水平上调3倍以上的基因分别为78条、89条和59条,占检测基因总数的16.3%、18.5%和12.3%.结论 PNS诱导上调的基因均与细胞增殖和分化相关,与我们报道的血液病动物模型、造血干/祖细胞、基因转录调控和蛋白激酶等研究结果相符,为PNS的作用提供了基因表达谱方面的有力证据.
-
运用新一代抗肿瘤药物分类系统指导中医学研究
在反复比较第一代与第二代抗肿瘤药物分类系统的基础上,提出了第三代抗肿瘤药物分类系统,将抗肿瘤药物分为细胞毒药物、细胞生物行为调节剂、生物应答调节剂与生化调节剂.生物应答调节剂(如免疫调节剂)和生化调节剂(即化疗增效减毒剂)常常是西医肿瘤治疗的补充手段,而中药的细胞毒作用通常明显低于化疗药物,要想在中医肿瘤学研究取得新的突破,就必须采用"新思维、新技术、新靶点",从新的角度研究中药的作用机制.中药逆转肿瘤细胞生物学行为异常可能是中医肿瘤学研究的一个重要突破口.
-
黄芪多糖和小檗碱对3T3-L1脂肪细胞糖代谢及细胞分化的影响
目的比较黄芪多糖和小檗碱对脂肪细胞糖代谢和细胞分化的影响,并分析其改善糖代谢的可能机制.方法检测黄芪多糖和小檗碱干预的脂肪细胞对3H-葡萄糖的摄取,对黄芪多糖和小檗碱干预分化的细胞进行油红O染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度.逆转录多聚酶联反应(RT-PCR)检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA的表达.结果黄芪多糖和小檗碱组葡萄糖摄取率分别为正常组的109.3%和182.7%;黄芪多糖明显促进分化及其PPARγmRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);小檗碱则明显抑制细胞分化及PPARγ、C/EBPαmRNA表达,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01).结论黄芪多糖促进脂肪细胞葡萄糖摄取及细胞分化和PPARγmRNA表达,而小檗碱促进葡萄糖摄取但抑制脂肪细胞分化和PPARγ及C/EBPαmRNA的表达.
-
当归多糖对K562细胞增殖抑制与诱导分化的实验研究
目的:探讨中药当归的主要有效成分当归多糖(APS)在白血病分化疗法中的应用价值.方法:应用细胞计数、流式细胞术、形态学、细胞化学、细胞分化免疫表型等现代实验血液学检测技术,研究APS对人红白血病细胞株K562细胞的增殖与分化的作用.结果:APS对K562细胞有明显的增殖抑制作用(P＜0.05);经APS诱导后K562细胞向红系、粒单系细胞方向分化增加,联苯胺染色、糖原染色和过氧化物酶染色阳性率、细胞表面分化抗原CD15表达明显增强(P＜0.05);APS诱导后K562细胞表达C-MYC明显降低(P＜0.05).结论:APS体外可抑制K562细胞增殖,并诱导其向红系、粒系细胞方向分化,是较有开发和应用前景的天然诱导剂.
-
兔骨髓基质细胞源性神经干细胞诱导分化及移植修复脊髓损伤实验研究
目的:探究骨髓基质源性神经干细胞对于修复脊髓损伤的可行性和可靠性.方法:采用新西兰白兔作为研究对象,提取骨髓基质细胞加以培养分化,手术方式将骨髓基质细胞源性神经干细胞悬浊液移植到脊髓损伤部位,观察损伤区域再生情况.结果:早期培养细胞在无诱导分化时能表达巢蛋白,表明其有干细胞活性;干细胞移植后脊髓损伤部位增殖细胞排列无层次,且BrdU染色呈阳性.结论:兔骨髓基质细胞在合适的体外培养条件下能分化成干细胞,具有增殖分化能力,可以应用于修复脊髓损伤等神经学科领域.
-
菟丝子含药血清对成骨细胞代谢调控的影响
目的 探讨菟丝子含药血清对体外培养大鼠成骨细胞代谢调控的影响.方法 采用血清药理学方法制备菟丝子含药血清；采用改良的组织块法体外培养大鼠成骨细胞；分别用5％、10％、15％、20％菟丝子含药血清诱导培养成骨细胞24h、48h、72h后,MTT法检测大鼠成骨细胞的增殖情况；用对硝基苯二钠基质动力学法(PNPP)测定细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活性；培养48h后用RT-PCR方法检测I型胶原(COL-I)mRNA的表达. 结果 5％和10％菟丝子含药血清在48h和72h能显著促进成骨细胞增殖并提高ALP活性；在48h时10％菟丝子含药血清可促进COL-I mRNA的表达.结论 10％菟丝子含药血清能够明显促进大鼠成骨细胞的增殖与分化,表明其具有促进成骨作用.
-
推动中医学术的三个进步——《中医脑病学》读后
如何推动中医学术的进步,长期以来一直萦绕于中医学界同仁的胸臆,为此我也一直苦苦进行思考与探索.近来对这个问题似乎从朦胧中渐渐清晰起来.将其初步归结为三点:一是理论的产出与发展;二是学科的分化与构建;三是治疗学的丰富与提高,这三点互动起来,中医学的进步就有了标志,就有了动人的前景.之所以启发我产生这些想法.应该说与我读一本书有关.这本书是王永炎、张伯礼两院士主编的<中医脑病学>.该书的学术成就,可以从以下方面得到印证.
-
5-氮胞苷与HGF因子体外联合诱导人骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞实验探讨
目的 探讨5-氮胞苷(5-Aza)与肝细胞生长因子(HGF)作为诱导剂,对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化为心肌样细胞的影响.方法 采用密度梯度培养法与贴壁培养法相结合分离培养hMSCs,取第3代hMSCs随机分为3组,分别为HGF因子诱导分化组、5-Aza诱导分化组、HGF因子与5-Aza联合诱导分化组,诱导后培养4周,采用免疫细胞化学法对分化的心肌样细胞进行鉴定.结果 结果表明hMSCs贴壁呈集落生长,有成纤维细胞样外观.各组诱导后细胞均呈梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成.免疫细胞化学法检测心肌特异性蛋白结蛋白( Desmin)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)表达阳性,未经诱导的同培养天数的hMSCs中均未见表达.HGF不能诱导hMSCs向心肌细胞转化,但HGF因子与5-Aza联合诱导分化组心肌样细胞分化率明显高于其他两组.结论 hMSCs体外在HGF诱导下可定向分化为心肌样细胞,5-Aza与HGF体外联合应用可以提高hMSCs的诱导分化效率.
-
大鼠成骨细胞对动态拉伸刺激的生理响应
应用体外周期性机械拉伸装置研究机械拉伸对大鼠成骨细胞增殖及分化的影响.测试了在应变15%,频率20次/min的拉伸刺激下不同加载时间对成骨细胞增殖及分化的影响.发现在受载12h时,细胞相对增殖指数大,随受载时间的增加而逐渐趋向于1,受载36h后,碱性磷酸酶活性的相对指数显著.说明成骨细胞对周期性机械拉伸刺激的响应与受载时间相关联,并且受载的成骨细胞经过自身调控后,逐渐适应于新的力学环境,保持一种新的平衡状态.
-
骨组织工程化培养中成骨细胞电学环境的影响
目的探讨电学环境对培养在聚吡咯/聚乳酸(PPy/PLA)骨组织工程材料上成骨细胞的影响.方法化学氧化法制备含有10%PPy的PPy/PLA复合膜,将3～6代原代培养的成骨细胞种植其上,使用O、12.5、25、50、75、100、125、150、175和2001μA/cm2的电流密度刺激,分别使用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活性和胞外钙基质的含量测定成骨细胞在复合膜上的增殖、分化和矿化情况.结果 50和75μA/cm2是促进细胞增殖的适合电流值,50μA/cm2能显著促进细胞的分化和矿化.结论电刺激可以促进种植在电活性材料上成骨细胞的增殖,提高细胞的活性,为骨组织的重建、加速骨界面的愈合开辟一条新的道路.
关键词： 成骨细胞 聚吡咯/聚乳酸复合膜 增殖 分化 矿化 -
牙髓干细胞培养及分化的研究进展
干细胞是未分化的细胞，具有自我更新、高度增殖及多向分化等特性。牙髓干细胞（ dental pulp stem cell，DPSC）不仅具有干细胞的上述特性，而且具有取材方便、易于培养、易于冷藏等优点。本文就 DPSC 与其他三种干细胞在培养多向分化潜能、分化诱导因素、向诱导性多功能干细胞（ induced pluripotent stem cell，iPSC）的分化潜能以及在组织工程学中的应用进行比较，并讨论 DPSC 的培养及分化优势。
-
DFAT 细胞体外分化诱导实验及体内生物学特性综述
去分化脂肪（ dedifferentiated fat ，DFAT）细胞，由于来源广泛、取材方便、增殖能力强、免疫原性低、表型稳定，很大程度上符合再生医学对理想种子细胞的要求，现已成为各个领域的研究热点。本文对体外诱导DFAT细胞向多个方向分化的诱导方法及DFAT细胞在动物模型体内的多向分化和组织修复特性进行了综述。目前对DFAT的研究仍滞留于寻求更高效的分化诱导因子的早期阶段，若欲将DFAT细胞作为再生医学的种子细胞投入临床应用，仍需大量的研究与探索。
-
小鼠皮质神经祖细胞分化过程中Twist1的功能
目的 检测Twist1在小鼠大脑皮质发育过程不同时间点的表达模式,并对其基因功能进行初步研究.方法 在小鼠皮质组织切片中,用原位杂交检测Twist1基因的表达;构建基因的过表达克隆,在小鼠胚胎中在体转染神经祖细胞,检测神经祖细胞的分化情况.结果 在选取大脑皮质发育的4个时间点Twist1均有表达,表达部位以室管膜区为主,过表达Twist1后室管膜区的细胞明显减少(P＜0.01),中间前体细胞增多(P＜0.05).结论 Twist1在小鼠大脑皮质发育过程中有表达,且在祖细胞表达量较高,Twist1可以促进神经祖细胞分化及迁移.
-
大鼠脂肪干细胞体外诱导为光感受器细胞和视网膜色素上皮细胞
目的 探讨大鼠的脂肪干细胞(ADSCs)体外诱导为光感受器细胞和视网膜色素上皮(RPE)细胞的方法.方法 经贴壁筛选法连续传代纯化细胞,流式细胞仪检测CD45、CD90、CD49d、CD106鉴定ADSCs.用EGF、激活素A、牛磺酸、视黄酸和视网膜细胞提取液单独诱导ADSCs;用EGF+牛磺酸、EGF+视黄酸、牛磺酸+视黄酸、EGF+牛磺酸+视黄酸联合诱导,免疫荧光法和流式细胞仪检测细胞的视紫红质、CK和S-100的表达.结果 原代ADSCs,CD45阳性率是1.6%,CD90是71.3%,CD49d是7.8%,CD106是3.5%.从传1～5代,CD45阳性率是0.8%～9.3%,CD90是84.7%～94.8%,CD49d是16.8%～31.0%,CDl06是8.3%～22.2%.各代ADSCs中,CD49d的阳性率均高于CD106.ADSCs的视紫红质的诱导效应是17.5%～46.O%,CK的诱导效应是19.7%～79.3%,S-100的诱导效应是27.3%～50.7%.结论 ADSCs具有向光感受器细胞和RPE细胞分化的潜能.
