首页 > 文献资料
-
补阳还五汤对大鼠脑缺血后蛋白激酶B1和c-Jun氨基末端激酶1/2表达的影响
目的探讨补阳还五汤对脑缺血后大鼠蛋白激酶B1（AKT1）和c-Jun氨基末端激酶1/2（JNK1/2）的影响。方法将48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组，每组12只。采用大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型。补阳还五汤组大鼠于术后2h起灌服补阳还五汤（主要由生黄芪120g、当归6g、赤芍4.5g、川芎3g、西红花3g、桃仁3g、广地龙3g组成）14.2 g/kg，每日1次，连续7 d。其他各组动物均给予等体积生理盐水。于第7日处死大鼠，取脑组织，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定AKT1 mRNA表达，采用免疫组化法检测JNK1/2蛋白表达。结果与正常对照组和假手术组比较，模型组AKT1 mRNA表达量〔吸光度（A）值〕明显降低（0.48±0.08比0.63±0.11、0.61±0.09，均P＜0.05），JNK1/2阳性细胞数（个/mm2）明显增多（34.13±4.57比16.15±1.09、16.23±2.05，均P＜0.05）；与模型组比较，补阳还五汤组脑组织中AKT1 mRNA表达（0.93±0.11）和JNK1/2阳性细胞数（45.04±5.68）明显增加，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论补阳还五汤可上调缺血脑组织AKT1 mRNA和JNK1/2阳性细胞数表达，是其脑保护作用机制之一。
关键词： 补阳还五汤 脑缺血 蛋白激酶B1 c-Jun氨基末端激酶1/2 -
JNK通路在高糖促人乳腺癌MCF-7细胞增殖中的作用
目的探讨c-Jun氨基末端激酶( JNK)信号通路在高糖促进人乳腺癌MCF-7细胞增殖中的作用。方法体外培养人乳腺癌 MCF-7细胞,分为低糖组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)；高糖组(葡萄糖浓度为25 mmol/L)；加药组：高糖+不同浓度特异性JNK信号转导通路抑制剂SP600125(10、20、40、80μmol/L)。四亚基偶氮唑盐( MTT)比色法检测各组作用24、48、72 h细胞增殖水平；倒置显微镜下观察细胞形态；Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞技术检测作用24 h 后细胞凋亡率；Western blot 检测作用24 h 后细胞内JNK1/2及磷酸化JNK1/2( p-JNK1/2)蛋白的表达水平。结果① MTT检测结果显示：与低糖组比较,高糖能够促进MCF-7细胞增殖( P <0.05), SP600125可以抑制高糖对MCF-7细胞的促增殖作用( P<0.05)；②凋亡检测结果显示：低糖组与高糖组凋亡率差异无统计学意义,SP600125呈浓度依赖性促进高糖环境下MCF-7细胞的凋亡( P<0.05)；③ Western blot检测结果显示：与低糖组比较,高糖组MCF-7细胞p-JNK1/2蛋白表达量增加( P<0.05),且 p-JNK/JNK比值上升( P<0.05)；与高糖组相比,不同浓度的SP600125可以明显降低p-JNK1/2蛋白的表达( P<0.05),并下调p-JNK/JNK的比值( P<0.05)。结论抑制JNK信号通路后可以抑制高糖所诱导的MCF-7增殖,并诱导其凋亡。
关键词： c-Jun氨基末端激酶1/2 SP600125 乳腺癌 细胞凋亡 增殖 -
JNKMAPK信号通路在食管癌细胞系Eca-109细胞中的作用机制
目的 探讨c-jun氨基末端激酶1/2(c-jun N-teuninal kinase,JNKl/2)信号通路在食管癌细胞系Eca-109细胞中的作用.方法 体外培养Eca-109细胞,以特异性JNK信号转导通路抑制剂SP600125处理Eca-109细胞；RT-PCR的方法检测JNK1和JNK2基因的表达,Western blot法检测JNK和p-JNK蛋白的表达,MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 Eca-109细胞经SP600125分别处理24h和48 h后,分别与对照组比较,JNK1 mRNA的表达无统计学差异(均P＞0.05),JNK2 mRNA的表达也无统计学差异(均P＞0.05),但活化的JNK即P-JNK1/2蛋白的表达显著减少,细胞的增殖显著被抑制,细胞的凋亡率有统计学差异(均P＜0.05).结论 JNK信号通路可能在Eca-109细胞的发生发展中发挥重要作用.
关键词： c-Jun氨基末端激酶1/2 SP600125 食管癌 细胞凋亡 增殖
