首页 > 文献资料
-
苦瓜籽MAP30的聚乙二醇化学修饰条件优化及纯化研究
目的 探讨聚乙二醇修饰苦瓜籽核糖体失活蛋白(MAP30)的反应条件以及修饰产物的纯化方法.方法 在不同条件下,将聚乙二醇活性酯(mPEG)2-NHS与MAP30反应,用SDS-PAGE分析不同反应条件对产物成分的影响;采用Sephacryl S-300 HR分子筛柱色谱法对修饰产物进行分离纯化,TNBS法测定目标产物PEG-MAP30的氨基修饰度.结果 聚乙二醇修饰MAP30的优反应条件为4℃,pH 8-5硼酸硼砂缓冲液,MAP30质量浓度1 mg/mL,MAP30与(mPEG)2-NHS质量比1:10为佳修饰条件,5 min内反应完全;反应产物进一步纯化,经SDS-PAGE检测目标产物PEG-MAP30中不含未修饰的MAP30;TNBS法测定MAP30的氨基修饰度为44.9%.结论 初步确定了聚乙二醇修饰MAP30的反应条件和修饰产物的纯化方法.
关键词： 苦瓜籽 核糖体失活蛋白(MAP30) 聚乙二醇 化学修饰 -
苦瓜籽活性成分的药理研究进展
苦瓜籽是葫芦科植物苦瓜的种子,来源广泛且安全有效,具有较高的药用价值.通过对近10年国内外研究苦瓜籽活性成分的药理作用现状进行综述,总结有效活性成分是苦瓜籽核糖体失活蛋白质及多肽、油脂、黄酮、皂苷和微量元素等,具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、减肥以及抗病毒真菌的活性,并指出了苦瓜籽在药品、功能性食品及保健品方面中的应用前景.
-
苦瓜籽蛋白的分离、纯化及其抗氧化作用的研究
苦瓜籽经粉碎抽提,硫酸铵沉淀,阳离子交换及凝胶柱层析等步骤纯化,得到一种蛋白,SDS-SPAGE和IEF显示为单一条带,相对分子质量28000,PI 8.9～9.0,该蛋白类SOD活性为16.71U/mg pr.
-
苦瓜籽粗多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性
目的:优化苦瓜籽粗多糖的提取工艺,并对苦瓜籽粗多糖进行体外抗氧化活性研究.方法:采用水提醇沉法提取苦瓜籽粗多糖,通过苯酚硫酸法测定多糖含量,以多糖提取率为考察指标,考察提取温度、时间、料液比以及提取次数4个因素对苦瓜籽粗多糖提取率的影响.在单因素实验基础上,进行L9(34)正交实验设计,优化苦瓜籽粗多糖的提取工艺.检测苦瓜籽粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率及总还原能力.结果:温度是影响苦瓜籽粗多糖提取率的重要因素,确定了佳提取工艺条件是提取温度为90℃,料液比为1:30,提取时间为2.5 h,提取3次,苦瓜籽粗多糖的提取率为5.61%.苦瓜籽粗多糖对DPPH自由基和羟自由基的清除能力接近于维生素C,而对超氧阴离子自由基清除能力和总还原能力不及维生素C.结论:该优化工艺适用于苦瓜籽粗多糖的提取,高浓度苦瓜籽粗多糖具有较好的抗氧化活性.
-
不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的 PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异?
目的：探究 PEG 化学修饰对4种常用蛋白浓度测定方法的影响。方法采用福林-酚试剂法(Lowry 法)、二喹啉甲酸法(BCA 法)、考马斯亮蓝法(Bradford 法)和紫外分光光度法(UV 法)分别测定样品中α-苦瓜素和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白 MAP30经 PEG 修饰前、后的蛋白含量；并用 Lowry 法和 BCA 法对低浓度游离 PEG 修饰前、后的样品蛋白含量进行测定。结果发现考马斯亮蓝不与样品发生颜色反应,PEG 修饰后会使UV 法测定值变大,Lowry 法测定值略有变大,BCA 法基本不受影响；低浓度的游离 PEG 对测定方法无影响,但高浓度的 PEG 会吸附 Folin-酚,形成黄色絮状物。结论PEG 化学修饰对蛋白浓度测定方法影响小的为 BCA 法, Lowry 法灵敏,Bradford 法不适用；而 PEG 化学修饰会使 UV 法测定值增大20%~30%,可作为快速测定时的校准参考。
-
苦瓜籽蛋白的提取及抗菌作用研究
目的:探讨用缓冲液浸提法粗提取苦瓜籽蛋白的方法,研究苦瓜籽蛋白的抗菌作用.方法:将苦瓜籽粉过滤、浸提、离心、浓缩,用BCA法测定粗提取苦瓜籽蛋白的浓度,用已知浓度的苦瓜籽粗提取蛋白做抗菌实验.结果:粗提取蛋白质浓度为69.5mg/ml,苦瓜籽蛋白对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌、解淀粉芽孢杆菌表现出明显的抑菌活性.结论:缓冲液浸提法操作简便,且能获得高浓度蛋白,可抑制金黄色葡萄球菌等常见菌的生长繁殖.
