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姜黄素纳米粒冻干粉的反溶剂法制备工艺优化及溶出特征
目的 优化姜黄素(Cur)纳米粒冻干粉(CNLP)制各工艺.方法 以丙酮作为溶剂,去离子水作为反溶剂,聚山梨酯-80 (P80)作为表面活性剂,甘露醇作为冻干保护剂通过反溶剂法制备CNLP,采用单因素分析法进行CNLP制备工艺的优化.影响CNLP粒径大小的因素有Cur质量浓度、溶剂与反溶剂体积比、表面活性剂用量、沉积时间、搅拌速率、冻干保护剂用量;得到的CNLP与原粉进行饱和溶解度和体外溶出对比实验.结果 制备CNLP优工艺为Cur质量浓度8mg/mL、溶剂与反溶剂比1∶5、表面活性剂用量0.05％、沉积时间5min、搅拌速率400 r/min、冻干保护剂甘露醇与Cur质量比4∶1;获得的CNLP平均粒径大小为(172.2±4.6) nm;CNLP复溶液Zeta电位为(-19.7±3.7)mV;SEM图谱显示Cur原粉呈不规则的大块状,粒径在20 μm左右.CNLP呈不规则的均匀块状结构,粒径在170 nm左右,与原粉相比粒径明显减小.从以上CNLP的形态来看,由激光粒度仪测得的CNLP平均粒径是基本一致的.通过饱和溶解度检测,在去离子水中,CNLP的饱和溶解度是原粉的41.32倍;在人工胃液中,CNLP饱和溶解度是原粉的1.74倍;在人工肠液中,CNLP饱和溶解度是原粉的4.11倍.通过溶出度检测,在去离子水中,CNLP的溶出速率是原粉的14.51倍;在人工胃液中,CNLP的溶出速率是原粉的2.33倍;在人工肠液中,CNLP的溶出速率是原粉的44.79倍.结论 反溶剂法制各的CNLP可以改善Cur水溶性,有利于提高Cur的生物利用度.
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反溶剂法制备叶黄素酯纳米粒
目的 优化叶黄素酯(LE)纳米粒(NPs)的制备工艺,并对其水溶性的改善程度进行测试.方法 以四氢呋喃为溶剂,去离子水为反溶剂,泊洛沙姆188作为表面活性剂,通过反溶剂法制备LE-NPs,采用单因素实验设计法优化LE-NPs制备工艺.并综合利用扫描电子显微镜、激光粒度仪、X射线衍射、差示扫描量热法等分析方法对获得的LE-NPs理化性质进行表征;采用气相色谱(GC)进行溶剂残留测定;并进行了体外溶出对比实验.结果 LE-NPs的优制备条件为沉积时间10 min,叶黄素酯质量浓度50 mg/mL,溶剂反溶剂体积比为1:7,泊洛沙姆188质量分数0.5％,搅拌速率950 r/min,沉积温度25℃;所得LE-NPs为球形,平均粒径为164 nm,其中四氢呋喃残留量为344.3 tg/g,低于人用药物注册技术要求国际协调会(ICH)要求的低标准(0.780 mg/g);在人工胃液环境中LE-NPs的饱和溶解度和溶出速率分别是原药的2.91倍和9.65倍.结论 反溶剂法制备的LE-NPs具有较好水溶性,在口服制剂中具有潜在的用途.
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熊果酸纳米粒的乳化溶剂蒸发制备工艺、表征及溶出特征
目的 优化熊果酸纳米粒(ursolic acid nanoparticles,UANs)的制备工艺,对其进行表征,并考察其溶解度和溶出速率的改善情况.方法 采用乳化溶剂蒸发法,以氯仿-乙醇(7∶3)为有机相、超纯水为水相、泊洛沙姆188为表面活性剂和冻干保护剂制备UANs.利用单因素实验筛选制备UANs的优条件,并以粒径大小作为单因素实验的考察条件.影响UANs粒径大小的因素包括表面活性剂浓度、有机相与水相的体积比、匀浆速度和匀浆时间、均质压力和均质次数.利用激光粒度仪、扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)和差示扫描量热法(DSC)对UANs进行表征.并就熊果酸(UA)原粉和UANs冻干粉的饱和溶解度和溶出速率进行对比测试.结果 制备UANs的优工艺:泊洛沙姆188的质量分数为0.05％,有机相和水相的比为1∶4,匀浆速度为7 000 r/min,匀浆时间为2min,均质压力为50.0 MPa,均质次数为6次.在优条件下制备UANs的粒径为(157.5±28.0) nm,电位为(20.33±1.67) mV.根据粒径正态分布曲线,UANs粒径分布均一;由SEM图像可知,UANs的形态近球形.通过XRD和DSC检测,可以确定纳米粒中UA已转变成无定形态.UANs冻干粉在人工胃液(SGF)、人工肠液(SIF)和去离子水中的饱和溶解度分别是原粉的13.48、11.79和23.99倍.UANs冻干粉在SGF和SIF 2种介质中的溶出速率分别比原粉提高了14.72倍和74.35倍.结论 利用乳化溶剂蒸发法制备的UANs改善了UA的水溶性,有利于提高UA的生物利用度.
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射干内生真菌SRAP-PCR反应条件的优化
以从射干中分离纯化出的96株内生真菌DNA为研究对象,采用单因素试验设计,对影响SRAP-PCR反应的DNA模板、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶和引物对浓度进行了优化,以确定适合射干内生真菌的SRAP-PCR反应佳反应体系.结果表明,建立的射干内生真菌佳反应体系为20 μL,反应体系中含10×PCR buffer(不合Mg2)2.0 μL,DNA模板50 ng,Mg2+浓度为2.5mmol·L-1,dNTPs为0.5 mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5U.利用该反应体系从90对引物中筛选出可扩增清晰、稳定性好条带的引物38对.该体系为今后利用SRAP分子标记技术开展射干内生真菌的分子遗传学研究奠定基础.
关键词： 射干 内生真菌 相关序列扩增多态型标记 单因素优化
