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相关序列扩增多态型标记文献资料
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射干内生真菌SRAP-PCR反应条件的优化
以从射干中分离纯化出的96株内生真菌DNA为研究对象,采用单因素试验设计,对影响SRAP-PCR反应的DNA模板、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶和引物对浓度进行了优化,以确定适合射干内生真菌的SRAP-PCR反应佳反应体系.结果表明,建立的射干内生真菌佳反应体系为20 μL,反应体系中含10×PCR buffer(不合Mg2)2.0 μL,DNA模板50 ng,Mg2+浓度为2.5mmol·L-1,dNTPs为0.5 mmol·L-1,引物1.0μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.5U.利用该反应体系从90对引物中筛选出可扩增清晰、稳定性好条带的引物38对.该体系为今后利用SRAP分子标记技术开展射干内生真菌的分子遗传学研究奠定基础.
关键词： 射干 内生真菌 相关序列扩增多态型标记 单因素优化
